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连接转化 已有7人参与
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| 扩出的基因片段2000bp左右，切胶回收的产物经电泳检测了，条带清晰。连接转化，挑斑摇菌后，用M13引物和自己的引物检测菌液，都检测不出来，求大神指点啊！这种菌液有必要送公司测序吗？ |
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2楼2014-10-13 12:14:23
cjl25413477
木虫 (正式写手)
欧巴
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 2593
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- 专业: 植物病理学
【答案】应助回帖
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-10-13 15:55:59
青青草allan: 金币+2, ★有帮助 2014-10-14 22:31:24
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kx444555: 鼓励交流 2014-10-13 15:55:59
青青草allan: 金币+2, ★有帮助 2014-10-14 22:31:24
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请问下你是直接用菌液做的模板么？如果是这样的话有两种可能导致你的pcr失败：1、如果你的菌液的OD不够的话，会导致你的模板数量不够；2、如果使用菌液直接做的模板：培养基的成分很复杂，会影响到你的扩增体系，从而导致你的pcr失败。 如果你是把你的菌液离心然后用超纯水洗过两遍以上的菌体作为模板，并且没有做阴性和阳性对照，我想有两种结果：1、是你pcr体系没有做好！2、是你根本没有转化成功！ 建议：还是等结果确定后再送测序吧！ |
3楼2014-10-13 15:29:33
4楼2014-10-13 16:06:28
5楼2014-10-13 16:16:47
6楼2014-10-13 23:18:49
7楼2014-10-14 22:28:42
8楼2014-10-14 22:31:07
9楼2014-10-14 22:31:42
10楼2014-10-14 22:33:00
