应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 连接转化
172/2返回列表上一页12
查看: 1665  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:18:49
质粒验证，还是要靠酶切。

TA克隆的话，两组酶切：

（1）HindIII单酶切；
（2）salI、EcoRI双酶切。

阳性克隆：（1）约5Kb；（2）约3kb，跑长时间，胶浓度大些，载体与片段条带也可区分。

好的，试一下。谢谢！
回复此楼
爱出者爱返，福往者福来
11楼2014-10-14 22:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
青青草allan(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:04:38
引用回帖:
7楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-10-14 22:28:42
没有做对照。因为之前短片段菌液检测时也没做过对照，很容易就出来了...

菌液PCR经常会有假阳性，另外因为体系中成分复杂、影响因素较多，经常也会出现扩增无结果的情况，所以建议以后做菌液PCR还是加上对照好些。
赞一下 回复此楼
12楼2014-10-14 23:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaowenqiang

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
青青草allan(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:04:47
青青草allan: 金币+1, ★有帮助 2014-10-16 21:55:06
两种方法：
1、找一个构建好的鉴定为阳性的质粒作为对照跑电泳；
2、酶切鉴定
赞一下 回复此楼
13楼2014-10-15 09:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhen0209

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-10-14 22:28:42
没有做对照。因为之前短片段菌液检测时也没做过对照，很容易就出来了...

一般情況下沒有對照也沒關係，但是遇到問題時候，必須做對照組才能很快找出你的問題在哪裡
赞一下 回复此楼
14楼2014-10-16 07:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhen0209 at 2014-10-16 07:54:38
一般情況下沒有對照也沒關係，但是遇到問題時候，必須做對照組才能很快找出你的問題在哪裡...

嗯，好的，谢谢了！
回复此楼
爱出者爱返，福往者福来
15楼2014-10-16 21:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hmily890404

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-29 20:50:50
菌液PCR的体系实在是太复杂了。。我通常鉴定从来都不会用菌液PCR，出来的结果阴性的阳性的感觉都不大可靠。还是把质粒提出来再鉴定最靠谱了。也就是多一步提质粒，但是结果更加可靠！何乐而不为~~
赞一下 回复此楼
16楼2014-11-29 20:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hmily890404

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-10-16 21:54:59
嗯，好的，谢谢了！...

同是昆虫学的！
回复此楼
17楼2014-11-29 20:21:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 青青草allan 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 40ms4Wlo4umh 2026-09-14 4/200 2026-09-17 04:26 by k06BKNblrGRH
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 23jxep3nCNZb 2026-09-14 5/250 2026-09-17 03:50 by k06BKNblrGRH
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 5/250 2026-09-17 02:50 by Tql5LQhh5rLK
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 7/350 2026-09-17 02:14 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 8/400 2026-09-17 02:04 by Tql5LQhh5rLK
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-17 01:50 by Tql5LQhh5rLK
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yaCh4X3wd045 2026-09-14 3/150 2026-09-16 20:39 by MHf40yA0Uhyb
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 8/400 2026-09-16 18:37 by rRvxEj3zorCy
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +8 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-16 18:36 by rRvxEj3zorCy
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-16 14:27 by i3KBRD19ERkG
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组｜2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 0pYnUiPDfdnk 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:51 by LH5NkK5Ud4bh
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 6/300 2026-09-16 03:50 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 3/150 2026-09-16 02:38 by DgNGHc3h5tPl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 Aj1rhIDL5ixY 2026-09-14 3/150 2026-09-15 19:59 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +7 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:23 by CgyNCDVNhGVg
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-15 14:58 by CgyNCDVNhGVg
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭