应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 连接转化
172/2返回列表上一页12
查看: 1595  |  回复: 16
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 反应链 at 2014-10-13 23:18:49
质粒验证，还是要靠酶切。

TA克隆的话，两组酶切：

（1）HindIII单酶切；
（2）salI、EcoRI双酶切。

阳性克隆：（1）约5Kb；（2）约3kb，跑长时间，胶浓度大些，载体与片段条带也可区分。

好的，试一下。谢谢！
回复此楼
爱出者爱返，福往者福来
11楼2014-10-14 22:34:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★
青青草allan(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:04:38
引用回帖:
7楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-10-14 22:28:42
没有做对照。因为之前短片段菌液检测时也没做过对照，很容易就出来了...

菌液PCR经常会有假阳性，另外因为体系中成分复杂、影响因素较多，经常也会出现扩增无结果的情况，所以建议以后做菌液PCR还是加上对照好些。
赞一下 回复此楼
12楼2014-10-14 23:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaowenqiang

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
青青草allan(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:04:47
青青草allan: 金币+1, ★有帮助 2014-10-16 21:55:06
两种方法：
1、找一个构建好的鉴定为阳性的质粒作为对照跑电泳；
2、酶切鉴定
赞一下 回复此楼
13楼2014-10-15 09:39:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhen0209

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-10-14 22:28:42
没有做对照。因为之前短片段菌液检测时也没做过对照，很容易就出来了...

一般情況下沒有對照也沒關係，但是遇到問題時候，必須做對照組才能很快找出你的問題在哪裡
赞一下 回复此楼
14楼2014-10-16 07:54:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青青草allan

银虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhen0209 at 2014-10-16 07:54:38
一般情況下沒有對照也沒關係，但是遇到問題時候，必須做對照組才能很快找出你的問題在哪裡...

嗯，好的，谢谢了！
回复此楼
爱出者爱返，福往者福来
15楼2014-10-16 21:54:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hmily890404

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-11-29 20:50:50
菌液PCR的体系实在是太复杂了。。我通常鉴定从来都不会用菌液PCR，出来的结果阴性的阳性的感觉都不大可靠。还是把质粒提出来再鉴定最靠谱了。也就是多一步提质粒，但是结果更加可靠！何乐而不为~~
赞一下 回复此楼
16楼2014-11-29 20:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hmily890404

新虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 青青草allan at 2014-10-16 21:54:59
嗯，好的，谢谢了！...

同是昆虫学的！
回复此楼
17楼2014-11-29 20:21:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 青青草allan 的主题更新
172/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 04:07 by 6vVgjDL4CnGu
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:47 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 3/150 2026-08-08 03:27 by 6vVgjDL4CnGu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +9 且听虎啸 2026-08-07 12/600 2026-08-07 21:53 by 理想三旬2025
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[论文投稿] 十年后又回来了，论文投稿求助 +4 哈哈114477 2026-08-01 4/200 2026-08-07 14:39 by jgy194592
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭