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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

[求助] 为什么cDNA浓度比较低的时候溶解曲线有杂峰 已有1人参与

为什么cDNA浓度比较低的时候溶解曲线有杂峰
见图，有杂峰的那两个里加了160pg 和24pg 量的RNA转录出来的cDNA
没杂志的那三个线里加了20 ng, 4 ng 和800 ng量的RNA转录出来的cDNA
是不是说我在做实验的时候就不要选取cDNA浓度太低了？

为什么cDNA浓度比较低的时候溶解曲线有杂峰
melting_curve.jpg
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The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
1楼 2014-10-09 08:25:17
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fuyuandj86: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-10-10 22:49:57
说明你普通PCR做少了
模板太少，得到的产物就会少，那么一个后果就是free primer太多，这时候各种primer dimer形成的比例都会增加。
走个agarose gel你就会看见
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-10 19:39:47
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