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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取不出来
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fengdaox

金虫 (小有名气)
先用碱变性做做看
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11楼2014-10-10 12:50:41
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qiahaoo

银虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-11 23:03:58
之前提质粒也提不出后来发现是用试剂盒提的时候裂解不充分，后来就在说明书的基础上适当增加裂解时间就好了

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12楼2014-10-10 13:20:48
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Albert_Ren

金虫 (初入文坛)
怀疑你的菌有问题，如果里面压根没有质粒你是提不出来的，这个需要确定。

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13楼2014-10-10 14:10:27
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by fanwq258 at 2014-10-09 14:21:08
前几天找出来一个5年前的质粒小提试剂盒，试了试竟然和新买的试剂盒提取质量差不多。...

吓人
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14楼2014-10-10 18:43:04
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yanggoing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sunxijunim at 2014-10-09 15:23:19
你的是什么菌株呀，可能是G+ ，也许你没注意。再有可能就是你的质粒需要诱导一下大量复制吗？
低拷贝的质粒你可以培养一段时间后加入氯霉素，之后再过三到四个小时提质粒。按照说明书的步骤一步一步来。
如果还有 ...

是大肠杆菌。好的，谢谢
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15楼2014-10-10 22:16:01
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yanggoing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by qiahaoo at 2014-10-10 13:20:48
之前提质粒也提不出后来发现是用试剂盒提的时候裂解不充分，后来就在说明书的基础上适当增加裂解时间就好了

请问你们裂解多长时间？
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16楼2014-10-10 22:17:24
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yanggoing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by Albert_Ren at 2014-10-10 14:10:27
怀疑你的菌有问题，如果里面压根没有质粒你是提不出来的，这个需要确定。

这是刚买到的，也不知道里面到底有没有。正在发回商家让他们看看
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17楼2014-10-10 22:21:30
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qiahaoo

银虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by qiahaoo at 2014-10-10 13:20:48
之前提质粒也提不出后来发现是用试剂盒提的时候裂解不充分，后来就在说明书的基础上适当增加裂解时间就好了

说明书是5分钟，我是根据说明书上裂解完全的那个颜色指示来确定的，由半透亮变为透亮蓝色
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18楼2014-10-12 12:56:23
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