应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 质粒提取不出来
52/1返回列表
查看: 2052  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yanggoing

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取不出来 已有3人参与

最近新购买了大肠杆菌，里面的质粒怎么也提取不出来。还麻烦高手帮我看看是什么原因所致。加了抗生素能生长，且也没有污染杂菌。提取过程如下，挑取单菌落于1ml LB培养基培养4小时，后转移50ul至25ml LB中过夜培养，菌量也看过，没有问题。用的是天根试剂盒提取，步骤都是按它上面的做，后面检测总是没有条带。请各位高手帮我看看是什么原因，谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2014-10-08 10:57:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanggoing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by sunxijunim at 2014-10-09 15:23:19
你的是什么菌株呀，可能是G+ ，也许你没注意。再有可能就是你的质粒需要诱导一下大量复制吗？
低拷贝的质粒你可以培养一段时间后加入氯霉素，之后再过三到四个小时提质粒。按照说明书的步骤一步一步来。
如果还有 ...

是大肠杆菌。好的，谢谢
赞一下 回复此楼
15楼2014-10-10 22:16:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

生物是个坑

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yanggoing: 金币+5 2014-10-08 21:02:26
提完建议测下浓度，你说的检测是跑的电泳？按照你的秒杀若是操作没有问题那么换换试剂盒或者是传统方法SDS碱裂解法做一次试试。
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-08 15:49:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

白风

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议换个试剂盒试试。
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-08 16:29:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

去哪里看海

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，你的大肠杆菌确实里面有质粒对吗？？？
没有用过天根的试剂盒，我们用的索莱宝，不过试剂盒的问题应该不是主要的吧？？没过期吧？？溶液I加入酶了吗？
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-08 19:09:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学求调剂 +4 临泽境llllll 2026-03-17 5/250 2026-03-21 02:23 by JourneyLucky
[考研] 307求调剂 +10 冷笙123 2026-03-17 10/500 2026-03-21 01:54 by JourneyLucky
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +12 墨墨漠 2026-03-18 13/650 2026-03-21 01:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +5 77chaselx 2026-03-20 5/250 2026-03-20 23:42 by lovewei0727
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 5/250 2026-03-20 22:11 by 云游重阳
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿，福州大学材料专硕339分求调剂 +3 木子momo青争 2026-03-15 3/150 2026-03-17 07:52 by laoshidan
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-14 3/150 2026-03-16 16:39 by houyaoxu
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 求老师收留调剂 +4 jiang姜66 2026-03-14 5/250 2026-03-15 20:11 by Winj1e
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
[考研] 297一志愿上交085600求调剂 +5 指尖八千里 2026-03-14 5/250 2026-03-14 17:26 by a不易
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭