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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 农杆菌侵染烟草
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押沙龙1989

新虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌侵染烟草 已有3人参与

各位虫友好，我最近在做农杆菌侵染烟草，烟草切片汞灭菌之后没有预培养，直接用农杆菌GV3101侵染，再共培养，抗生素卡那，利福平，庆大霉素都是50mg/L，共培养第三天出现各种染菌情况，好像还不止一种杂菌，不知道是什么情况，求各位前辈指点一下！

农杆菌侵染烟草
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牵牛花呀，一朵深渊色。
1楼 2014-10-07 15:21:38
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押沙龙1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by madainv at 2014-10-09 12:18:59
无菌仪器装备什么的难道不是应该灭菌后马上在无菌环境操作进行使用吗……...

我的有些是上次做的时候灭的，剩下的就留到这次继续用了，摇菌，叶子预培养，灭菌，做得不是很熟悉，所以时间衔接得不是很好。进实验室有一个月了，农杆菌侵染烟草还是做得没什么进展，总是重复在制培养基，切叶片，摇菌，各种培养，各种叶片死亡和染菌，挺有挫败感的。
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牵牛花呀，一朵深渊色。
8楼2014-10-09 16:02:50
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
押沙龙1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-08 08:41:16
培养基上的是滤纸么？貌似用滤纸就是很容易污染，你可以把滤纸去了再试试看，另外操作时注意点，勤消毒，我去年养愈伤的时候用过滤纸各种污染，去掉后就好了
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行到水穷处，坐看云起时
2楼2014-10-07 22:40:09
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押沙龙1989

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 焃__麟 at 2014-10-07 22:40:09
培养基上的是滤纸么？貌似用滤纸就是很容易污染，你可以把滤纸去了再试试看，另外操作时注意点，勤消毒，我去年养愈伤的时候用过滤纸各种污染，去掉后就好了

共培养垫一层滤纸有利于抑制农杆菌的生长啊，我问了一下老师，他说照片上那些红色的就是农杆菌。还有一些其他的菌，白色的，绿色的，，，额，做了好几次了，总容易染菌，滤纸应该怎样灭菌才好呢？我这滤纸是一两个星期前用报纸包着灭菌锅灭的，之后一直是报纸裹着放抽屉，这样容易染菌么？还有，把培养瓶换成培养皿是不是会要好一些？
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牵牛花呀，一朵深渊色。
3楼2014-10-08 10:15:32
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
押沙龙1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-09 10:59:54
我做的时候共培养基不加糖（抑制农杆菌生长）共培养基用的液体，我个人认为你可以试试把滤纸去了（感觉没必要用），实在不想去掉滤纸就用新灭的吧
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行到水穷处，坐看云起时
4楼2014-10-08 16:50:24
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