| 查看: 1003 | 回复: 5 | |||
[求助]
离子交换过程中的困惑，算是交流吧，希望大家积极发言 已有4人参与
|
|
我的蛋白是包涵体溶解后的变性蛋白直接用Q柱纯化，在两个盐浓度下都有目的蛋白洗脱下来（如图），我的困惑是：同一个蛋白为什么会在两个不同的盐浓度下洗脱下来？ 从电泳图上看，高浓度盐洗下来的蛋白要杂一些，会不会是这些目的蛋白和杂蛋白聚集在一起了，这样他们带的电荷要高一些，洗脱就要晚一些呢。 我的缓冲液里有8M urea和70mM 2-Me，脲的话主要是对蛋白的氢键作用，巯基乙醇是二硫键，除了这两个键以外能使蛋白聚集在一起的就剩疏水键了。如果是疏水键作用加什么东西比较好呢。阴离子型的去垢剂肯定不行，另外，低温也不太好，一是因为我用的是pH8.0 Tris-HCl缓冲液，二是因为低温下8M脲容易结晶。 这种情况不知道大家有没有遇见过，我的分析不知道对不对，希望这里的大神们可以给一些建议，讨论一下。  未命名.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
青椒八年已不青，大家都被折磨成啥样了？
已经有11人回复
-
限项规定
已经有9人回复
-
免疫学博士有名额，速联系
已经有4人回复
-
交叉科学部支持青年基金，对三无青椒是个机会吗？
已经有5人回复
-
国家基金申请书模板内插入图片不可调整大小?
已经有6人回复
-
国家级人才课题组招收2026年入学博士
已经有5人回复
-
Fe3O4@SiO2合成
已经有6人回复
-
青年基金C终止
已经有4人回复
-
26申博求博导推荐-遥感图像处理方向
已经有4人回复
-
西南交通大学国家级人才团队2026年博士研究生招生（考核制）—机械、材料、力学方向
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 关于保研的一些困惑，希望大家帮忙分析一下
已经有28人回复
- 关于保研的一些困惑，希望大家帮忙分析一下
已经有44人回复
- 负载型分子筛催化剂制备过程中pH的调节
已经有12人回复
- 【求助/交流】蛋白质的阴离子交换纯化
已经有13人回复
- 【求助/交流】关于离子交换柱的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】又没人用过Q Sepharose® Fast Flow这种阴离子交换柱，请教一下洗脱
已经有11人回复
2楼2014-09-29 10:29:02
3楼2014-09-29 11:09:14
wolfman840
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 2
- 应助: 225 (大学生)
- 金币: 3524.8
- 散金: 20
- 红花: 12
- 帖子: 702
- 在线: 63.2小时
- 虫号: 902627
- 注册: 2009-11-14
- 性别: GG
- 专业: 生物技术药物
4楼2014-09-30 14:33:03
pennchem
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +21 - BioEPI: 5
- 应助: 297 (大学生)
- 金币: 10397.5
- 散金: 65
- 红花: 28
- 帖子: 596
- 在线: 1098.8小时
- 虫号: 2139205
- 注册: 2012-11-21
- 专业: 生物大分子结构与功能
- 管辖: 生物科学
5楼2014-09-30 19:46:36
6楼2014-10-11 13:30:11