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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

[求助] 荧光染料cy5.5如何用EDC和NHS活化羧基,用量是多少,活化后如何连接氨基? 已有1人参与

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xuecsu

木虫 (正式写手)


同样问题,一起吧!!!
2楼2014-10-10 22:44:11
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xuecsu at 2014-10-10 22:44:11

同样问题,一起吧!!!

嗯啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-10-12 19:51:56
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bucter2010

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
鬼羽帝魂: 金币+5, ★有帮助 2014-10-14 17:25:54
活化部分不清楚,楼主可以在论坛上找找看,资料还挺多的。标记部分我在网上找到的,希望能够帮到楼主。
氨基封端的OLIGO可以标记CyDye SE,但是非常困难;标记前因为OILGO经氨水脱保护,请务必洗
  涤掉所有的残余氨水。然后将样品真空干燥;然后溶于0.25 ml 的0.5 M NaCl 溶液中,用Sephadex G-50
  脱盐,用5.0 mM borate 缓冲液平衡到pH=8.0,然后用以上硼酸缓冲液冲下OLIGO。然后浓缩至干的样
  品溶于0.1 M carbonate buffer (pH 8.5-9.0);在0.5mL碳酸缓冲液中30 nmoles的OLIGO加入到CyDye SE
  的玻璃瓶中室温避光,密闭搅拌反应60min。反应物经Sephadex G-50或 RP-HPLC过柱纯化,冷冻干燥
  后避光保存。
  注意:Oligonucleotides 和oligopeptides由于太小经常会留在过滤膜上或在冻存管内贴壁
  成膜,而无法标记。
学着学着就会了
4楼2014-10-14 16:42:53
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by bucter2010 at 2014-10-14 16:42:53
活化部分不清楚,楼主可以在论坛上找找看,资料还挺多的。标记部分我在网上找到的,希望能够帮到楼主。
氨基封端的OLIGO可以标记CyDye SE,但是非常困难;标记前因为OILGO经氨水脱保护,请务必洗
  涤掉所有的残 ...

谢谢。我帮我同学发的贴。@xuecsu
5楼2014-10-14 17:26:33
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