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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用HiTAChi U-2910扫描蛋白波长发现在216nm处竟然有最大吸收峰，这是什么原因啊
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风雪云

木虫 (小有名气)

[求助] 用HiTAChi U-2910扫描蛋白波长发现在216nm处竟然有最大吸收峰，这是什么原因啊 已有2人参与

用HiTAChi U-2910扫描蛋白波长发现在216nm处竟然有最大吸收峰，这是什么原因啊
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1楼 2014-09-23 23:37:28
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shijianlong

铜虫 (初入文坛)
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-26 19:22:16
酰胺键在那个位置可能有吸收峰，所有的氨基酸对紫外（200-400nm）都有一定程度吸收包括216nm处有吸收峰，只不过摩尔吸收系数大小不一样而已。如果非要说清楚哪一个，不可能。我有一张图谱来说明，是来自国外的生化课本。你自己看，至少有3种芳香族氨基酸（aromatic amino acids）在216nm处有吸收。见下表，数据绝对可靠，老外的生化课本（引用别人的）
用HiTAChi U-2910扫描蛋白波长发现在216nm处竟然有最大吸收峰，这是什么原因啊
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2楼2014-09-24 16:13:00
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shijianlong at 2014-09-24 16:13:00
酰胺键在那个位置可能有吸收峰，所有的氨基酸对紫外（200-400nm）都有一定程度吸收包括216nm处有吸收峰，只不过摩尔吸收系数大小不一样而已。如果非要说清楚哪一个，不可能。我有一张图谱来说明，是来自国外的生化课 ...

我加大蛋白浓度，在270左右吧有一个很小的峰，这算吗

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3楼2014-09-24 23:43:12
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
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西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-26 19:22:31
补充下，所有氨基酸在远紫外区（200-220nm）均有明显紫外光吸收，肽键在该波长范围内存在较强紫外光吸收，因此蛋白质在该区也就有紫外吸收峰，一般教科书上只强调蛋白质由于含有色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸三种有共轭键的氨基酸，所以蛋白在280nm处有紫外吸收峰。
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4楼2014-09-25 14:29:17
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shijianlong

铜虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by 风雪云 at 2014-09-24 23:43:12
我加大蛋白浓度，在270左右吧有一个很小的峰，这算吗
...

一般270左右有的话更像tyr的吸收峰，但是我们实验室用的日历的3010紫外一般在毫摩级的时候，跟上图出的曲线是基本一致的。你这个蛋白质的话内部键间结构也有影响，基本不能单纯依靠280左右来定性啊，你用荧光试试
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5楼2014-09-25 16:24:49
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shijianlong

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 风雪云 at 2014-09-24 23:43:12
我加大蛋白浓度，在270左右吧有一个很小的峰，这算吗
...

蛋白质只能按照三个氨基酸的近似吸收来算，270位置我觉得可以算
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6楼2014-09-25 16:26:20
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by shijianlong at 2014-09-25 16:26:20
蛋白质只能按照三个氨基酸的近似吸收来算，270位置我觉得可以算...

主要270峰值太小，而200-220之间有一个很高的峰，这算正常吗？
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7楼2014-09-25 18:18:07
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shijianlong

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 风雪云 at 2014-09-25 18:18:07
主要270峰值太小，而200-220之间有一个很高的峰，这算正常吗？...

感觉不太正常
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8楼2014-09-26 12:07:24
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)
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7楼: Originally posted by 风雪云 at 2014-09-25 18:18:07
主要270峰值太小，而200-220之间有一个很高的峰，这算正常吗？...

应该是正常的，270处的峰由三种氨基酸产生，而200-220之间的峰由所有氨基酸间的肽键产生。
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9楼2014-09-26 15:10:53
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风雪云

木虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by stone2239 at 2014-09-26 15:10:53
应该是正常的，270处的峰由三种氨基酸产生，而200-220之间的峰由所有氨基酸间的肽键产生。...

可是在280附近吸收值相对较小（几乎很小），这也正常吗？

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10楼2014-09-27 10:34:01
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