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日记布

金虫 (正式写手)

[求助] 内生细菌和内生真菌分离鉴定的问题 已有3人参与

看了好多文献,简要来说都是对植物组织表面消毒,然后就在NA或者PDA平皿上反复划线,他们就分离出50多株菌。我现在很迷茫的就是这个50株菌的含义是什么呢?通过显微镜观察到属,但种是确定不了啊,那所在属的他们说分理出多少株是什么意思啊!!!还有就是划线分真菌啊!!真菌全是菌丝体,怎么出单菌落啊?怎么看出我分离出了一株纯的菌啊,还有就是显微镜下真菌全是菌丝体啊啊,根本确定不了,还有啊除了菌体颜色,菌丝稠密度和基质颜色来划分的话,哪来的那么多株!现在要分离细菌了,马上开题了啊!!!求大神解答疑惑啊!!!!!!
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日记布

金虫 (正式写手)

咋没人回
2楼2014-09-17 19:38:49
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日记布

金虫 (正式写手)

求回复啊!!!
3楼2014-09-18 08:13:03
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李寡人

金虫 (正式写手)

楼主乃真小白,好好看书补基础
4楼2014-09-19 09:58:43
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蔡丽

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你好,我也做的内生菌,纯化后可以做PCR,之后利用16sPNA确定序列,有现成的数据库。
5楼2014-09-19 19:21:08
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mimi_pudding

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

找本别人的毕业论文好好看看,真菌貌似是用稀释涂布然后菌块?不晓得,
以前师兄做的好像是分离出很多很多个菌落,然后编号,然后鉴定,如果确定形态 生理生化 分子都一样的,就化成同一株,如果不同的就是不同株。
用显微镜看能看到很细的结构吧,真菌貌似有很多分类的指标,比如产抱结构,高倍镜下能看到的,实在需要再上SEM。看看别人文章上发表的图都是多大倍数的 什么显微镜,
估计你需要找本细菌 真菌鉴定手册 伯杰氏啥的
6楼2014-09-21 10:46:03
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日记布

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by mimi_pudding at 2014-09-21 10:46:03
找本别人的毕业论文好好看看,真菌貌似是用稀释涂布然后菌块?不晓得,
以前师兄做的好像是分离出很多很多个菌落,然后编号,然后鉴定,如果确定形态 生理生化 分子都一样的,就化成同一株,如果不同的就是不同株。 ...

看了的,看了你的意思就是需要先分离后得到很多菌株,再用显微镜观察是吗,分子当然准确啊,可是50多株菌做分子不太现实吧,经费也没那么多啊
7楼2014-09-25 15:52:59
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酱油党

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

前面的显微观察没做过,说后面的吧,菌丝体也是有差异的呀,肉眼是可以观察到的(没有做过细菌,我分离的真菌,pda里加了抗生素的),观察形态基本可以确定是不是一株,我做的时候是观察形态基本确定是一株之后就its扩增测序鉴定,然后根据鉴定结果你在考虑你下面的实验
8楼2014-09-26 16:36:58
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mimi_pudding

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 日记布 at 2014-09-25 15:52:59
看了的,看了你的意思就是需要先分离后得到很多菌株,再用显微镜观察是吗,分子当然准确啊,可是50多株菌做分子不太现实吧,经费也没那么多啊...

楼下说的蛮对的吧,先显微镜能先分下类,再分子做,
如果只有50多,不算很多吧,我师兄分了500多,分到20类。
先形态分小类,菌落pcr,很快的,做2重复,2次就做完了,测序倒是贵了。
9楼2014-09-26 21:20:46
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