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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 关于石蜡切片过程
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一路向前看

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于石蜡切片过程 已有2人参与

求助！石蜡切片过程中组织固定一般多长时间（材料是蚂蚁）？各级脱水一般多长时间？浸蜡时能否只用一种石蜡，若是一种石蜡，中间需要换蜡杯吗？浸蜡时间多长？包埋是如何防止石蜡迅速凝固，来不及包埋石蜡就凝固了。。。求回答
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1楼 2014-09-16 11:13:25
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Demagy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by hlxxym at 2015-08-15 09:03:39
需要1/2酒精+1/2二甲苯
...

在切斑马鱼仔鱼的时候您是切多少厚度的，做了一下5mm很容易出现把仔鱼切没的情况，但1mm的话又会很难切出蜡带
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7楼2015-08-15 10:03:11
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-09-16 20:21:47
1、没切过蚂蚁。切过斑马鱼胚胎，固定时间24h，你可以参考一下。
2、各级脱水时间也是得看样品的。斑马鱼胚胎的话，我的经验是50%  1h，75% 50min，85%  40min，95%  30min，100%  10min×2。
3、浸蜡我只用一种石蜡，高熔点或者低熔点都可以。中间需要换一次，共2h。
4、包埋时点个酒精灯，准备一把镊子，如果石蜡表面凝了，用烧热的镊子搅动一下。但总归还是要快。
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2楼2014-09-16 17:03:06
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一路向前看

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hlxxym at 2014-09-16 17:03:06
1、没切过蚂蚁。切过斑马鱼胚胎，固定时间24h，你可以参考一下。
2、各级脱水时间也是得看样品的。斑马鱼胚胎的话，我的经验是50%  1h，75% 50min，85%  40min，95%  30min，100%  10min×2。
3、浸蜡我只用一种石 ...

非常感谢楼主的回答，可还有个疑问，浸蜡只用一种蜡，为什么中间要换一次呢，不能在一个蜡杯里边一次完成吗？
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3楼2014-09-17 09:44:09
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hlxxym

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
一路向前看: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-18 16:12:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一路向前看 at 2014-09-17 09:44:09
非常感谢楼主的回答，可还有个疑问，浸蜡只用一种蜡，为什么中间要换一次呢，不能在一个蜡杯里边一次完成吗？...

这是一个循序渐进的过程
酒精——二甲苯——二甲苯+石蜡——石蜡1——石蜡2——包埋
之所以换一次石蜡，一方面是为了把二甲苯置换干净，一方面是为了达到更好的透蜡效果
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4楼2014-09-17 10:15:35
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