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cxzcxz1988

铜虫 (初入文坛)

[交流] 为什么PCR产物通过核酸定量仪定量很低,而跑凝胶电泳却有很亮的条带? 已有6人参与

为什么PCR产物通过核酸定量仪定量很低,而跑凝胶电泳却有很亮的条带?PCR产物定量只有6ng/ul,而凝胶电泳却有非常亮的条带。欢迎讨论!
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焃__麟

铜虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-11 09:29:23
可以将你得到的条带跟marker对比下,根据亮度可以判断下大概的量,marker中条带含量是已知的,仪器不太好说,我更相信跑胶的结果
行到水穷处,坐看云起时
2楼2014-09-10 20:28:29
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huyan0817

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
核酸仪器有问题,最好跟Maker比较!比较可靠些!
3楼2014-09-11 10:15:54
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王平阳

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-15 08:32:00
应该是仪器出了问题,根据marker比对吧,将marker条带与目的条带亮度数字化,再根据marker浓度及上样体积计算目的条带的浓度。
没有做不到,只有想不到!
4楼2014-09-11 14:47:39
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cxzcxz1988

铜虫 (初入文坛)

谢谢各位的回复!!!
5楼2014-09-14 20:52:38
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pennchem

专家顾问 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
一个问题,核酸定量的时候,用了什么作为空白呢?
行至水穷处,坐看云起时
6楼2014-09-14 21:18:43
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-10-09 12:07:32
PCR产物直接定量还是纯化后的,Blank是什么
7楼2014-09-15 08:25:51
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guobingyuan

铁杆木虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-09 12:07:36
如果用的是银染法,产生亮条带的原因可能是上样量过大导致过曝而发亮,解决的方法就是降低上样量。具体条件还要自己摸索
黎明之前天最黑
8楼2014-10-08 19:46:08
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