| 查看: 1044 | 回复: 7 | ||
[求助]
载体构建 已有2人参与
|
| 最近正在设计载体构建的引物，打算用PMD18-T ，PBI121构建正义表达载体，酶切位点用KpnI和XbaI，目的基因上没有这两个酶切位点，但是PMD18-T载体上有XbaI酶切位点，这样是可以做的吗？ |
回复此楼» 猜你喜欢
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有260人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有2人回复
Cynthiaxin
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1880
- 红花: 1
- 帖子: 105
- 在线: 104.6小时
- 虫号: 2131274
- 注册: 2012-11-16
- 性别: MM
- 专业: 细胞死亡
2楼2014-09-07 20:10:53
kehan777
木虫 (小有名气)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 2475.4
- 红花: 4
- 帖子: 163
- 在线: 109.9小时
- 虫号: 1949056
- 注册: 2012-08-21
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tuhua: 金币+2 2014-09-08 17:03:46
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:59:51
感谢参与，应助指数 +1
tuhua: 金币+2 2014-09-08 17:03:46
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-10 08:59:51
|
看了载体图谱，PMD18-T是有KpnI和XbaI 这两个酶切位点的，而PBI121只有XbaI，没有KpnI位点； 你说基因上没有这两个酶切位点，所以引物设计时你要在基因上加入酶切位点和保护性碱基； 对于插入到PMD18-T载体，设计引物时，直接加入酶切位点和保护性碱基在你的目的基因上即可， 对于插入到PBI121载体，XbaI一端的引物可以和PMD18-T的相同；KpnI一端的引物，你需要在基因上再加入一个“PBI121载体MCS有的，而你基因上没有的”酶切位点，假如BamHI，基因上没有，则引物的框架：保护性碱基+BamHI+KpnI+ 一段目的基因。 我想不一定非要KpnI这个酶切位点，你也可以选择载体上其他多克隆位点啊，保证翻译后ORF正确就行吧。 |
3楼2014-09-08 09:23:43
4楼2014-09-08 17:01:31
5楼2014-09-08 17:02:27
6楼2014-09-09 11:46:06
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- MolEPI: 1
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17189
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14526
- 在线: 2185.5小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
7楼2014-09-09 12:07:15
8楼2014-09-09 16:46:01
