应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 资料求助 » 关于病毒滴度
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 973  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

云海寻烟

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于病毒滴度 已有1人参与

各位虫友，我做了一次病毒滴度，但是很莫名其妙的细胞就死了，请各位虫友帮忙分析一下。
具体过程：
   1、用10%FBS的DMEM培养基培养Vero细胞
   2、做病毒梯度：用无血清无双抗的DMEM培养基稀释病毒液，分别得到-2、-3、-4三个梯度；
   3、待细胞长至80%左右时，将上述病毒加至12孔板中，100微升每孔，另每孔加1ml无血清无双抗培养基；
   4、2小时20分钟后换液，（因有事耽误了，没能在两小时之内换液，且换液前观察已发现部分细胞呈沙状）过夜培养
   5、观察发现，细胞大部分呈沙状。
附图：

关于病毒滴度
无标题004.jpg


关于病毒滴度-1
无标题002.jpg


关于病毒滴度-2
无标题003.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-04 15:37:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

云海寻烟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-09-04 16:47:09
1.添加的培养基支原体 检查情况如何？
2.病毒稀释手法有没有做平行？
3.病毒有没有吹打？
4.换带血清的稀释液稀释病毒试试。
5.接毒前细胞情况如何？
6.接毒后有没有做无毒细胞平行？平行情况如何？
7.稀释度 ...

1、培养基支原体情况没有检查，而且从来没有做过检查呀，请问一下这个该怎么检查呀？
2、没有做平行，以前都是用24孔板，而且是-4、-5、-6这三个梯度，现在用12孔板，-2、-3、-4这三个梯度，病毒量比较大就没做平行；
3、病毒吹打了，每个都用1ml枪头吹打50次；
4、以前做病毒稀释一直是用无血清的培养基稀释病毒的，从来没有出现过这种情况啊；
5、接毒前细胞状况良好；
6、有无毒细胞平行，用的是无血清无双抗的培养基，跟其他有病毒的细胞一块换的液，均换为10%血清的DMEM;
7、这个可以考虑一下，但是为什么会跟梯度有关呢？
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-05 09:01:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
云海寻烟(星海慧儿代发): 金币+1, 多谢回帖交流 2014-09-09 21:38:26
1.添加的培养基支原体 检查情况如何？
2.病毒稀释手法有没有做平行？
3.病毒有没有吹打？
4.换带血清的稀释液稀释病毒试试。
5.接毒前细胞情况如何？
6.接毒后有没有做无毒细胞平行？平行情况如何？
7.稀释度再多几个梯度试试。
赞一下 回复此楼
2楼2014-09-04 16:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wolfman840

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 云海寻烟 at 2014-09-05 09:01:20
1、培养基支原体情况没有检查，而且从来没有做过检查呀，请问一下这个该怎么检查呀？
2、没有做平行，以前都是用24孔板，而且是-4、-5、-6这三个梯度，现在用12孔板，-2、-3、-4这三个梯度，病毒量比较大就没做平 ...

你应该做一下支原体检查，排除培养基污染的情况，有很多试剂盒可以做，你搜一下药典方法。
平行是为了证明细胞本身没有问题，如果没有做平行，你不能排除细胞本身的问题。
病毒本身会有毒力变化，稀释度过少，毒力也就意味着高了，感染同体积细胞的病毒多了，细胞不耐受，就挂了。所以稀释度也有关系。
总之，你需要考虑三个方面，培养基、细胞本身、病毒。
赞一下 回复此楼
4楼2014-09-09 15:37:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

云海寻烟

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-09-09 15:37:31
你应该做一下支原体检查，排除培养基污染的情况，有很多试剂盒可以做，你搜一下药典方法。
平行是为了证明细胞本身没有问题，如果没有做平行，你不能排除细胞本身的问题。
病毒本身会有毒力变化，稀释度过少，毒 ...

恩  好 谢谢你
回复此楼
5楼2014-09-10 13:32:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 309求调剂 +13 谁不是少年 2026-03-29 13/650 2026-03-30 16:16 by 晶体之美
[考研] 085601材料工程找调剂 +16 oatmealR 2026-03-29 17/850 2026-03-30 11:04 by w虫虫123
[考研] 318求调剂 +7 陈晨79 2026-03-30 7/350 2026-03-30 10:49 by 探123
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 275求调剂 +15 Micky11223 2026-03-25 20/1000 2026-03-29 20:44 by 唐沐儿
[考研] 329求调剂 +10 钮恩雪 2026-03-25 10/500 2026-03-29 13:32 by peike
[考研] 343求调剂 +6 爱羁绊 2026-03-29 6/300 2026-03-29 12:00 by 无际的草原
[考研] 332求92调剂 +8 蕉蕉123 2026-03-28 8/400 2026-03-29 10:46 by 周梓丹
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 347求调剂 +3 山顶见α 2026-03-25 3/150 2026-03-28 14:13 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程，267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 材料求调剂 一志愿哈工大总分298分，前三科223分 +5 dongfang59 2026-03-27 5/250 2026-03-28 04:53 by wxiongid
[考研] 265求调剂 +8 小木虫085600 2026-03-27 8/400 2026-03-27 22:16 by 无际的草原
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 复试调剂，一志愿南农083200食品科学与工程 +5 XQTJZ 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:49 by 狂炫麦当当
[考研] 336材料求调剂 +7 陈滢莹 2026-03-26 9/450 2026-03-27 00:20 by wxiongid
[考研] 中国科学院深圳先进技术研究院-光纤传感课题组招生-中国科学院大学、深圳理工大学联培 +5 YangTyu1 2026-03-26 5/250 2026-03-26 18:27 by 猫咪猫咪呀
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭