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ELISA试验不显色,希望得到大家帮助 已有2人参与
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1) 样品为鱼肝micorsome,100ul加入ELISA板,每个样品三次重复。 2) 湿盒中,4度冰箱过夜。 3) 200ul 低盐缓冲液洗涤,轻微晃动洗3次每次5分钟 4) 5%脱脂奶粉封闭1小时 5) 200ul 低盐缓冲液洗涤,轻微晃动洗3次每次5分钟 6) 100ul 一抗,室温1.5小时 7) 200ul高盐缓冲液洗涤,轻微晃动洗3次每次5分钟 8) 100ul 二抗,室温1.5小时 9) 200ul高盐缓冲液洗涤,轻微晃动洗3次每次5分钟 10) 100ul TMB/OPD显色 30分钟 11) 1N 硫酸终止反应 TMB和OPD都已经试过了,均不显色,我猜测我试验的问题是蛋白没有煮过。希望大家帮我一下,谢谢。 |
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