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hnsea

铜虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1837.8
散金: 7
帖子: 249
在线: 488小时
虫号: 2853503
注册: 2013-12-06
性别: MM
专业: 环境卫生

[求助] 藻细胞破碎已有3人参与

培养好的藻细胞要提取基因组，关于细胞破碎有两个问题：
第一就是利用液氮研磨的话，但藻细胞含有一定的培养液，需要洗涤干净吧用超纯水洗是否可行？然后的步骤放-20度冰箱，再拿出来加液氮研磨吗？藻细胞外有一定的水分，那岂不是不能研磨成粉末，而是一团的东西？
第二就是不用液氮，直接在冰上，用研钵将其捣碎？
还有其他比较好的方法吗？
金币不多，请指导的虫虫海涵。

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当我哭泣我没有好看的鞋子时，却发现有人连脚都没有。

1楼 2014-08-27 01:02:27

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zff922

金虫 (正式写手)

应助: 5 (幼儿园)
金币: 1513.3
红花: 1
帖子: 559
在线: 55.7小时
虫号: 3159527
注册: 2014-04-24
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★
hnsea: 金币+1, ★★★★★最佳答案, 剩下的币少，再追加。感谢。 2014-12-03 14:44:21

特别是鉴定纯合体的时候，最为方便，因为藻类的菌落PCR往往条带不专一，所以也需要相对纯的DNA进行鉴定，但是只是鉴定的话，太纯的DNA抽取也浪费时间。所以我都是直接用水把离心的藻悬浮至100微升，加一点玻璃珠，震荡3次后直接离心去0.2微升的上清做PCR。效果很好，和纯的DNA没有区别。缺点就是只是鉴定用，然后就直接扔掉了。优点是，藻的用量少，操作简单，效果好。