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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 酚氯仿抽提中间层容易吸出来，如何解决
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dreadless

金虫 (初入文坛)

[求助] 酚氯仿抽提中间层容易吸出来，如何解决 已有2人参与

分离得到的细菌，用酚氯仿抽提基因组，中间蛋白层很容易随上清吸出来，都是一丝丝的，怎么处理？
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1楼 2014-08-24 11:35:37
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爱睡猪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
操作问题，用枪从上到下吸，下面的尽量不要
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ControlMyself
2楼2014-08-24 13:16:46
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xyj114114

木虫 (著名写手)
使用剪去枪尖的枪头来吸取上清，吸时要倾斜离心管，这样可避免吸到白色的一层蛋白。
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3楼2014-08-24 20:47:12
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dreadless: 金币+5, ★★★很有帮助, 还是谢谢了~ 2014-08-26 00:27:03
增加CTAB的量，或者调整缓冲液的氯化钠浓度到5mol/L以上；改进移液器的使用技巧也很必要。
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自然如此美丽！
4楼2014-08-24 21:47:58
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dreadless

金虫 (初入文坛)
内容已删除
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5楼2014-08-24 23:52:49
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Crocodile-YK

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by dreadless at 2014-08-24 23:52:49
CTAB配合0.7M氯化钠除多糖的步骤试过，效果也不明显，请问下调整氯化钠浓度到5M是为什么？...

你先试试，看有没有用。具体原理，我不记得了，应该分子克隆指南上有的。浓度不记得是溶液还是终浓度了，很久不做这些实验，生疏了。高盐可以促进蛋白析出和稳定吧。
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自然如此美丽！
6楼2014-08-25 00:02:29
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