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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 微生物gDNA琼脂糖凝胶电泳，问题
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WSXP1104

新虫 (小有名气)

[求助] 微生物gDNA琼脂糖凝胶电泳，问题 已有3人参与

琼脂糖凝胶电泳结果，如附件：
问题：1、样品1出现这中情况，有没有可能是上样量太大？
           2、样品2无条带？
            3、胶出现一半白一半稍黑的现象，是因为制胶时胶槽没有放平？

先谢谢了。

微生物gDNA琼脂糖凝胶电泳，问题
1.PNG
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1楼 2014-08-20 20:51:31
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Vy49

新虫 (初入文坛)
LZ，抱歉我不是来回答问题的，我是来继续请教的。我目前做的跟你很类似，我也出现了你类似的条带1和2，我想问一下你1的加样量有多大（浓度*体积）后，另外，你的第二条带的样本是确定没有DNA吗？我有没有跑出来的条带，可是做特异性PCR，却能够P出条带，我也不知道怎么回事。而且另外想问，你提微生物DNA时，有没有遇见浓度特别低的情况，一般你们采样和提取前处理是怎么做的啊？我是一个刚刚接触课题的新手，希望跟你学习哈，求LZ不吝赐教，给点经验，小女子不甚感激。
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13楼2015-04-06 15:47:07
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考拉003

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
WSXP1104: 金币+1 2014-08-21 09:14:09
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-08-21 12:30:40
1,我之前跑胶也会出现这种问题，我也觉得可能是浓度太高了，你这是点了多少样品，太高的话可以点四五微升就够了。
2.没有条带
3.你说胶配完后是一边黑还是？我还没有遇到过，如果你放在扫胶仪中一半变黑的话是因为放置的问题，不要紧。
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不是微生物专业的却进入微生物行业
2楼2014-08-20 21:08:17
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WSXP1104

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 考拉003 at 2014-08-20 21:08:17
1,我之前跑胶也会出现这种问题，我也觉得可能是浓度太高了，你这是点了多少样品，太高的话可以点四五微升就够了。
2.没有条带
3.你说胶配完后是一边黑还是？我还没有遇到过，如果你放在扫胶仪中一半变黑的话是因为 ...

我点了5ul样品，微生物是10的9次方级别，用100ul buffer AE 洗脱DNA。

你一般是用多少去洗脱DNA？
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3楼2014-08-21 09:13:47
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-21 12:30:51
WSXP1104: 金币+1, ★有帮助 2014-08-21 15:25:29
胶出现一半白一半稍黑的现象，是因为制胶时胶加了EB，当你跑胶时，下面的EB就跑出去了，所以最后就没有EB了，这也是为什么跑着跑着那些Marker的小条带很模糊或者消失了的原因。
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4楼2014-08-21 10:29:19
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