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fang2010

铜虫 (正式写手)

[求助] 为什么样品过滤前和过滤后吸光度不一样? 已有3人参与

测吸光度的时候,吸光度不稳定,咨询别人后说,原因有二:1、比色皿不干净;2、样品没有过滤。于是就把比色皿洗到我认为干净的程度,然后把样品用定性中速滤纸过滤了一下,吸光度是稳定了,可是为什么样品过滤前和过滤后吸光度不一样?过滤后偏小
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
fang2010: 金币+2 2014-08-20 10:51:10
测定吸光度,最好用0.45um滤膜过滤或者高速离心,除掉悬浮性颗粒物。吸光度的干扰因素较多,其中浊度就是重要因素之一。
加油!
2楼2014-08-19 19:39:55
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得没过滤时吸光度不稳定可能是溶解还不完全导致的,而过滤后稳定了是由于未溶完或未溶的粒子被滤掉了,过滤后吸光度下降可能是滤膜吸附导致的。
建议:溶液尽可能的溶解完全,如需过滤,则应弃去初滤的一定体积滤液(该体积需要考察)。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
3楼2014-08-20 08:44:42
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fang2010

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2014-08-20 08:44:42
我觉得没过滤时吸光度不稳定可能是溶解还不完全导致的,而过滤后稳定了是由于未溶完或未溶的粒子被滤掉了,过滤后吸光度下降可能是滤膜吸附导致的。
建议:溶液尽可能的溶解完全,如需过滤,则应弃去初滤的一定体积 ...

不太明白,那到底要不要过滤?怎么样来判断是否需要过滤?那个体积怎么考察?
4楼2014-08-20 10:53:39
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

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【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by fang2010 at 2014-08-20 10:53:39
不太明白,那到底要不要过滤?怎么样来判断是否需要过滤?那个体积怎么考察?...

先说如何判断“要不要过滤”的问题:一般澄清溶液无需过滤,溶液浑浊的肯定需要过滤,比如溶出度测定时的溶出液。
再说说你这个要不要过滤:如果溶液很澄清,只是一般的测定吸光度而已,那就无需过滤,但要保证样品充分溶解(选对溶剂,如果对超声稳定的话,可以超声助溶;强烈振摇也行);如果仍然是吸光度不稳定的话,建议可以滤过或离心处理后测定。
滤膜吸附实验:可以将同一份样品溶液分成不同份,分别离心、滤过、不处理,测定吸光度,可以从中发现是否存在滤膜吸附;若滤膜有吸附,但又非得滤过不可,可分别滤过2ml、5ml、8ml、10ml等体积(可自行设定)后取续滤液测定吸光度,待到吸光度与离心或未处理的吸光度几乎一致的那个体积就是滤过体积了。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
5楼2014-08-20 11:06:22
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fang2010

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2014-08-20 11:06:22
先说如何判断“要不要过滤”的问题:一般澄清溶液无需过滤,溶液浑浊的肯定需要过滤,比如溶出度测定时的溶出液。
再说说你这个要不要过滤:如果溶液很澄清,只是一般的测定吸光度而已,那就无需过滤,但要保证样 ...

滤过体积有什么用呢?
6楼2014-08-20 16:34:20
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星海慧儿

荣誉版主 (职业作家)

木虫精灵

优秀版主优秀版主

引用回帖:
6楼: Originally posted by fang2010 at 2014-08-20 16:34:20
滤过体积有什么用呢?...

可以使滤膜吸附达到饱和,这样后面的就不吸附了呀。
我是超级天后:天天努力,不落人后!
7楼2014-08-20 16:52:01
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梦之魇―魔魔

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 星海慧儿 at 2014-08-20 16:52:01
可以使滤膜吸附达到饱和,这样后面的就不吸附了呀。...

太优秀了答案,我今天要试一试,我的滤膜对空白样品有吸附,正愁找不到解决方案
不断提高认知,保持进步
8楼2021-11-22 10:07:11
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t892893235

木虫 (著名写手)

范德姆特大对勾

【答案】应助回帖

这个分析起来,原因很简单,无外乎两点,1是你的滤膜有吸附,这个很容易排除,做一个离心对比就能确定了;2是你的目标物溶液不完全,附带在颗粒中被你的滤膜截胡了,这个也很溶液排除,做各提取条件的研究就大概能知道。
9楼2021-11-23 08:30:41
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