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jing843

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求关于粘端平端连接 已有3人参与

由于目的基因和载体只能由一个酶切位点可用,所以只用这唯一的酶切位点切开载体和目的基因,一端平一端粘 的去连接。具体怎么做呐?请求帮助。
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a50044758

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jing843(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-18 10:03:44
NEB的T7连接酶,你可以看看,可以解决你的问题,T7连接酶只能连粘端,平端不能连,你可以第一步用T7连接酶连粘端,回收后,第二步用T4连接酶连平端.
9楼2014-08-17 23:05:42
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bio_sci

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【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流 2014-08-17 23:57:59
论坛里有方法,二次链接,中间多一步切胶回收步骤,你搜搜看

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-17 10:35:25
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jing843

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-17 10:35:25
论坛里有方法,二次链接,中间多一步切胶回收步骤,你搜搜看

谢谢,那我目的基因设计引物时只加一个酶切位点,这样行吗?
3楼2014-08-17 10:49:17
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bio_sci

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【答案】应助回帖

单切小心自连,用CIAP处理一下

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-08-17 13:56:50
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