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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 急求关于粘端平端连接
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jing843

铁虫 (初入文坛)

[求助] 急求关于粘端平端连接 已有3人参与

由于目的基因和载体只能由一个酶切位点可用，所以只用这唯一的酶切位点切开载体和目的基因，一端平一端粘 的去连接。具体怎么做呐？请求帮助。
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1楼 2014-08-17 10:00:53
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jing843

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-17 10:35:25
论坛里有方法，二次链接，中间多一步切胶回收步骤，你搜搜看

谢谢，那我目的基因设计引物时只加一个酶切位点，这样行吗？
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3楼2014-08-17 10:49:17
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流 2014-08-17 23:57:59
论坛里有方法，二次链接，中间多一步切胶回收步骤，你搜搜看

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2楼2014-08-17 10:35:25
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

单切小心自连，用CIAP处理一下

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4楼2014-08-17 13:56:50
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jing843

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-17 13:56:50
单切小心自连，用CIAP处理一下

非常感谢！我还想问一下，如果我目的基因设计引物时两端都加上那唯一的酶切位点，也不粘端平端连接了，直接用这单一的酶切位点单切后与载体的单切胶回收产物连接，请问这么做可行吗？
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5楼2014-08-17 14:24:56
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