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凤丫头1988

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by prominetsun at 2014-08-19 22:12:29
师兄只给了一管。。。DNA是酵母全基因组，基因组并没有跑胶。。。求问全基因组也可以跑胶的吗？不是没什么意义么。。。正常的话条带是什么样的？退火温度之前这个温度是能P出来的。。不知为什么现在就做不出来了。 ...

你先换个Taq酶试试，顺便重新提一下基因组吧，也不麻烦。
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最小的事情也要尽力
21楼2014-08-20 13:18:36
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凤丫头1988

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
19楼: Originally posted by prominetsun at 2014-08-19 22:12:29
师兄只给了一管。。。DNA是酵母全基因组，基因组并没有跑胶。。。求问全基因组也可以跑胶的吗？不是没什么意义么。。。正常的话条带是什么样的？退火温度之前这个温度是能P出来的。。不知为什么现在就做不出来了。 ...

之前做southern的时候会跑胶看一下基因组，基因组一般是一条很大的带
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最小的事情也要尽力
22楼2014-08-20 14:43:26
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prominetsun

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小松果2012 at 2014-08-17 10:27:03
考虑引物吧，我师妹也正遇到这个问题呢。

实验已做出来了，就是引物问题。太感谢啦！！！你的师妹解决了不？
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23楼2014-08-22 14:17:07
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prominetsun

金虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ncuduhan at 2014-08-17 11:15:25
可能是引物出现了问题，重新合成引物试试，或者是模板有问题~~~

啊啊啊！！！爱死你啦！！！就是引物的问题，我之前还怀疑酶啊，还有dNTP什么的，到最后还是引物！！！
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24楼2014-08-22 14:18:08
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prominetsun

金虫 (正式写手)
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7楼: Originally posted by 梦梦神 at 2014-08-17 11:55:18
我的最近也是P着P着啥也没了，模板也换的新的还是不行，正在合成新引物。
建议你重新买引物，真的不算贵，回来注意分装好，以后如果还是突然P不出来可以换你分装的另外一管试。

我已经做出来啦！超级哈皮！！不知你的怎么样啦？
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25楼2014-08-22 14:18:45
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prominetsun

金虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by wangranjun at 2014-08-17 15:06:47
已经稀释好的引物在4℃存放时间最好在一个月之内，时间久了可能就会扩增效率降低，你可以先重新合成一下引物，很便宜的。模板也有可能出问题的，不过我感觉若没有引物二聚体的条带的话可能是引物的问题，我前段时间 ...

跟你的问题一模一样的！！！不过我都浪费一个月在上面了。。。哭。。。没有引物二聚体，然后换了引物就做出来啦！！超感谢你！！
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26楼2014-08-22 14:19:55
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prominetsun

金虫 (正式写手)
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14楼: Originally posted by vapordw at 2014-08-18 14:59:57
有么有考虑是PCR仪出问题了- - 整个实验室其他人P的结果都好好的么？
如果不是仪器问题，可能就是引物出问题了吧- -也许放假的时候停电，然后 一个冰箱里的东西都化了了了了啦了

你说的没错。。。！！！
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27楼2014-08-22 14:20:40
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prominetsun

金虫 (正式写手)
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20楼: Originally posted by Joicy at 2014-08-20 09:47:53
我也遇到这样的问题，之前人家P出了正确的条带，一个月后我来做，怎么都P不出正确的条带，但是有条带，而且很单一。后来换了各种程序，换引物、模板，换酶，P出来的条带还不是正确的，我都快急死了。

我换了引物就好了，你看看dNTP是不是有问题~~~
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28楼2014-08-22 14:21:35
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小松果2012

银虫 (正式写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by prominetsun at 2014-08-22 14:17:07
实验已做出来了，就是引物问题。太感谢啦！！！你的师妹解决了不？...

不清楚，她回家了。
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29楼2014-08-22 16:39:03
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小松果2012

银虫 (正式写手)
引用回帖:
24楼: Originally posted by prominetsun at 2014-08-22 14:18:08
啊啊啊！！！爱死你啦！！！就是引物的问题，我之前还怀疑酶啊，还有dNTP什么的，到最后还是引物！！！...

呵呵，我是菜鸟，老公是高手，我一说问题，他马上就说是引物的问题。
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30楼2014-08-22 16:39:49
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