| 查看: 2316 | 回复: 32 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
prominetsun金虫 (正式写手)
|
[求助]
恳求各位大神支招，我快崩溃了！！！ 已有7人参与
|
|
|
各位虫友们，我是即将研二的新手，刚开始跟师兄做实验的时候，一切很顺利，PCR条带也很清晰，但是！过了一个月放假回来就不行了！怎么P都P不出来！！marker有条带，其余什么都没有了，样品就跟没添加过一样，放在紫外成像仪中什么都没有啊！！！为此我还做过对比试验，就是加新酶再做一遍，加新的dNTP再做一遍，但是都于事无补！！除了marker有条带什么都没有！！！现在实验处于停滞状态了，根本进行不下去。。。快哭了但是都不知道什么原因。。。照了其他实验室的PCR仪也没做出来。。。请问各位虫友有没有遇到过类似情况？非常希望大家能指点迷津！不然我就该急死了。。。 关于PCR: 我做的是 Pfu 酶的，片段长度在1.5 kb 左右，延伸时间一分半钟，流程为95°C解链，55℃退火，75℃延伸，无论配50u还是25u体系都没法P出来。。注意：我以前是可以P出来的。。。哭。。 各位大神，我最近两个月都浪费在上面了，无任何头绪，求各位的意见！要不就该被逼疯了。。。。。呜。。。。。呜。。。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有136人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
prominetsun
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1580.9
- 散金: 11
- 红花: 8
- 帖子: 447
- 在线: 124.3小时
- 虫号: 1671710
- 注册: 2012-03-07
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
23楼2014-08-22 14:17:07
小松果2012
银虫 (正式写手)
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 1156.6
- 红花: 4
- 帖子: 434
- 在线: 106.8小时
- 虫号: 2785314
- 注册: 2013-11-07
- 专业: 人类遗传学
2楼2014-08-17 10:27:03
prominetsun
金虫 (正式写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1580.9
- 散金: 11
- 红花: 8
- 帖子: 447
- 在线: 124.3小时
- 虫号: 1671710
- 注册: 2012-03-07
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2014-08-17 10:30:49
ncuduhan
银虫 (正式写手)
- 应助: 40 (小学生)
- 金币: 1623.5
- 帖子: 316
- 在线: 60.2小时
- 虫号: 3110387
- 注册: 2014-04-03
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2014-08-17 11:15:25
100