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dhyl

铜虫 (初入文坛)

[求助] DNA的AFM制样 已有1人参与

想请教一下DNA的AFM制样过程,我之前做的样品照射出来里面有许多杂质(猜想是合成过程中加入的PBS),完全找不到DNA链。基底是云母片。
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czhang07

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dhyl at 2014-08-13 13:31:44
我合成DNA里面用的是pbs,做AFM的老师说有可能是PBS里面的无机盐,然后我尝试洗过,但是还是有。然后做非DNA的样品就不会有这些杂质。...

如果有盐,可以把DNA吸附在mica上后在表面滴一滴水,静置个10s左右吹干,目的是把盐溶掉。如果确定不是盐的问题,那就要考虑你DNA样品是否干净了。实验中许多因素都会引起污染,一个一个排除会浪费你很多时间。最快的办法是更换试剂盒或重新提取DNA。
4楼2014-08-15 11:34:54
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czhang07

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dhyl: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-08-18 11:54:34
你说的这种情况很可能是制样不干净,新揭的云母要吹干净,DNA吸附上去后静置一会儿,然后用吸耳球轻轻吹干。 整个过程需要注意不要引入污染。
2楼2014-08-13 11:49:54
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dhyl

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czhang07 at 2014-08-13 11:49:54
你说的这种情况很可能是制样不干净,新揭的云母要吹干净,DNA吸附上去后静置一会儿,然后用吸耳球轻轻吹干。 整个过程需要注意不要引入污染。

我合成DNA里面用的是pbs,做AFM的老师说有可能是PBS里面的无机盐,然后我尝试洗过,但是还是有。然后做非DNA的样品就不会有这些杂质。
3楼2014-08-13 13:31:44
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dhyl

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by czhang07 at 2014-08-15 11:34:54
如果有盐,可以把DNA吸附在mica上后在表面滴一滴水,静置个10s左右吹干,目的是把盐溶掉。如果确定不是盐的问题,那就要考虑你DNA样品是否干净了。实验中许多因素都会引起污染,一个一个排除会浪费你很多时间。最快 ...

O(∩_∩)O谢谢,我回去再看一下
5楼2014-08-18 11:54:16
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