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阿衰小帅

金虫 (初入文坛)

[交流] 做液相想分开苯酚，对苯二酚，邻苯二酚，对苯醌，峰的分离效果不太好 已有4人参与

agilent的仪器，25℃下1，ml/min，用甲醇:水42:58流动相在245nm处检测，发现峰分离效果不理想。请问哥哥姐姐们知道的话告诉我怎么改下流动相配比或波长等，谢谢。

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1楼 2014-08-08 00:36:30
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hanyxin

木虫 (正式写手)
★
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自己走梯度看看呗

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2楼2014-08-08 01:00:23
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阿衰小帅

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hanyxin at 2014-08-08 01:00:23
自己走梯度看看呗

如何走，能不能说明白一点，小弟才刚刚接触液相色谱

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3楼2014-08-08 08:34:11
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long3378105

铁虫 (小有名气)
★
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建议梯度洗脱，可参照《高效液相色谱法分离和测定小麦中的5 种内源激素》这篇文章。
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Theworldismy！
4楼2014-08-09 13:45:01
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阿衰小帅

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by long3378105 at 2014-08-09 13:45:01
建议梯度洗脱，可参照《高效液相色谱法分离和测定小麦中的5 种内源激素》这篇文章。

没有想要的么

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5楼2014-08-09 15:23:51
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kaven186

银虫 (小有名气)
★
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你是用的什么色谱柱  C18吗？  苯环上面的同分异构体，我建议用PFP色谱柱去分离，可能会事半功倍。
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广州
6楼2014-08-11 09:47:11
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阿衰小帅

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kaven186 at 2014-08-11 09:47:11
你是用的什么色谱柱  C18吗？  苯环上面的同分异构体，我建议用PFP色谱柱去分离，可能会事半功倍。

嗯，C18的，长的短的都试过了，苯酚和对苯醌就是分不开，温度25℃，270nm波长，1ml/min及甲醇:水42:58就不敢试在把水往上调了，乙腈:水60:40也试过，苯酚与对苯醌也还是分不开

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7楼2014-08-11 19:44:12
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阿衰小帅

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by kaven186 at 2014-08-11 09:47:11
你是用的什么色谱柱  C18吗？  苯环上面的同分异构体，我建议用PFP色谱柱去分离，可能会事半功倍。

我们实验室里都是C18柱

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8楼2014-08-11 19:45:06
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jh9689

木虫 (小有名气)
★
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尝试一下加缓冲盐。

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做分析的，大家多交流
9楼2014-08-11 22:49:26
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kaven186

银虫 (小有名气)
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7楼: Originally posted by 阿衰小帅 at 2014-08-11 19:44:12
嗯，C18的，长的短的都试过了，苯酚和对苯醌就是分不开，温度25℃，270nm波长，1ml/min及甲醇:水42:58就不敢试在把水往上调了，乙腈:水60:40也试过，苯酚与对苯醌也还是分不开
...

因为两者的疏水性差异太小，C18就无能为力了。假如有那种嵌有极性基团的C18或者极性端基封尾C18（或没有封尾的柱子）可以试试看看。
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广州
10楼2014-08-12 09:28:03
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