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yulin07002

金虫 (小有名气)

[求助] 多糖抑菌试验求助! 已有1人参与

各位大侠:本人做了一个鱿鱼肌肉干粉(冷冻干燥)多糖粗提物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌的抑菌试验,结果发现一点抑菌效果都没有,但文献上报道说有抑菌的作用。不知道是真的没有抑菌效果还是我的方法不当。
我的方法是:准确称取0.1g粗多糖,溶于1mL的灭菌水中,但我怎么混都没有混匀,静置一段时间后会有沉淀析出,我就用移液枪取了还没有来的及沉淀的浑浊液5μl打到6mm的滤纸片上,等溶剂(水)干了后贴在含有菌的培养基上面,培养24h后观察抑菌圈。
给各位大侠赐教,或者告诉我做生物大分子的抑菌试验方法,我之前是做天然小分子化合物的,没有做过大分子抑菌试验这一块。
谢谢了!
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潇靖

铜虫 (初入文坛)

4楼2016-11-11 16:03:49
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jytryh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-08-07 18:53:03
大分子、小分子应该差不多吧,关键是要溶解,可以助溶一下试试。当然也可能本来就没有抑菌活性,方法不是太讲究吧。如纸片扩散法(K-B法)又称琼脂扩散法,琼脂扩散试验,琼脂稀释法,微量肉汤稀释法等
中医药是中华民族一颗璀璨的明珠
2楼2014-08-07 15:59:17
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yulin07002

金虫 (小有名气)

送红花一朵
谢谢这位大侠,请问多糖用水溶解,助溶剂选什么好点呢?
3楼2014-08-08 15:58:46
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YR-王

铜虫 (小有名气)

你用的是粗多糖如果仅仅是你水提醇沉之后的,含有一定量的杂质蛋白,在复溶时蛋白质可能就已经变性沉淀下来了,所以不溶物可能是蛋白,而且溶液里也可能存在蛋白,另外一个多糖如果分子量很大,溶解本来就很难,可能呈胶状吧。其实不管溶成什么样,你保证你做抑菌的时候样品是足够浓度的糖就好了,但是我觉得楼主得考虑一下蛋白的影响

发自小木虫IOS客户端
5楼2016-11-11 16:40:27
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