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plhappy2006

新虫 (初入文坛)

[交流] 多糖的脱色试验 已有3人参与

我用了2ml的多糖液,加了3ml的水,然后加了0.5%的活性炭,最后上清液稀释了20倍,苯酚硫酸法测定多糖浓度为17ug,怎么计算多糖保留率啊?我是不是需要准确知道使用活性炭之后溶液的体积?还是直接用测定的浓度*5ml就成啊?
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
【我用了2ml的多糖液,加了3ml的水,然后加了0.5%的活性炭,最后上清液稀释了20倍,苯酚硫酸法测定多糖浓度为17ug,】

1. 【加了3ml的水,然后加了0.5%的活性炭】后的上清液,多糖浓度为20 * 17 ug/mL= 340 ug/mL。
2. 虽然经活性炭吸附,但总的液体体积没变,还是2 mL 多糖液+ 3 mL 水 = 5mL。
3. 脱色后的多糖总量(没有被活性炭吸附,游离在水溶液中)= 5 mL * 340 ug/mL = 1700 ug.

4. 用同样的方法,测定原来 2mL 多糖液的多糖浓度(你要是没测, 那这批样就白做了)。假设为 1700 ug/mL。

那么你的收率为 1700/(1700*2 )= 50%.

5. 不要用脱色后有活性炭的溶液总体积,你的收率会过高。这是固液混合体积,不是水溶液体积。
例如,
0.5 % 活性炭,总体积可能为5.5 mL。
1 % 活性炭,总体积可能为6 mL。
2% 活性炭,总体积可能为7 mL。
这样计算,你按照收率的结果,会得出如下结论:
活性炭在0.5%~ 2% 范围内,能提高脱色过程中多糖的收率 ^_^


看到没有,关键是算脱色前后 游离多糖的总量,而脱色前后的水总量保持不变。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2014-06-26 10:02:17
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plhappy2006

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by HarveyWang at 2014-06-26 10:02:17
【我用了2ml的多糖液,加了3ml的水,然后加了0.5%的活性炭,最后上清液稀释了20倍,苯酚硫酸法测定多糖浓度为17ug,】

1. 【加了3ml的水,然后加了0.5%的活性炭】后的上清液,多糖浓度为20 * 17 ug/mL= 340 ug/m ...

谢谢,和我计算出来的一样,我计算了一下,发现多糖的保留率只有40%,脱色效果基本看不出来,所以这种多糖不太适合用活性炭脱色,非常感谢你的耐心回答!多谢多谢!
3楼2014-06-26 17:33:32
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我在给粗酶液脱色的时候发现每种活性炭的结构都不同,你得尝试多几种。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2014-06-26 20:20:14
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环境增值联盟

铁虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
2014化学生物学与一氧化氮(NO)国际会议      大会官网:http://broadway.sjtu.edu.cn,2014年7月4-6日,上海。议题:化学生物学、NO、组学(NO仅为议题中的三分之一)。诺贝尔医学奖获得者Ferid Murad教授担任大会名誉主席,科技部原副部长程津培院士担任大会主席。
5楼2014-06-27 11:15:53
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plhappy2006

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-06-26 20:20:14
我在给粗酶液脱色的时候发现每种活性炭的结构都不同,你得尝试多几种。

我们实验室只有一种颗粒状的,我试了一下,基本就没有脱色效果,5%都不行,然后多糖损失挺大的,我今天尝试下双氧水脱色,我觉得看起来效果也一般……
6楼2014-07-01 11:47:25
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