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plhappy2006

新虫 (初入文坛)

[交流] 多糖的脱色试验 已有3人参与

我用了2ml的多糖液，加了3ml的水，然后加了0.5%的活性炭，最后上清液稀释了20倍，苯酚硫酸法测定多糖浓度为17ug，怎么计算多糖保留率啊？我是不是需要准确知道使用活性炭之后溶液的体积？还是直接用测定的浓度*5ml就成啊？
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1楼 2014-06-23 21:17:25
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
【我用了2ml的多糖液，加了3ml的水，然后加了0.5%的活性炭，最后上清液稀释了20倍，苯酚硫酸法测定多糖浓度为17ug，】

1. 【加了3ml的水，然后加了0.5%的活性炭】后的上清液，多糖浓度为20 * 17 ug/mL= 340 ug/mL。
2. 虽然经活性炭吸附，但总的液体体积没变，还是2 mL 多糖液+ 3 mL 水 = 5mL。
3. 脱色后的多糖总量（没有被活性炭吸附，游离在水溶液中）= 5 mL * 340 ug/mL = 1700 ug.

4. 用同样的方法，测定原来 2mL 多糖液的多糖浓度（你要是没测， 那这批样就白做了）。假设为 1700 ug/mL。

那么你的收率为 1700/(1700*2 )= 50%.

5. 不要用脱色后有活性炭的溶液总体积，你的收率会过高。这是固液混合体积，不是水溶液体积。
例如，
0.5 % 活性炭，总体积可能为5.5 mL。
1 % 活性炭，总体积可能为6 mL。
2% 活性炭，总体积可能为7 mL。
这样计算，你按照收率的结果，会得出如下结论：
活性炭在0.5%~ 2% 范围内，能提高脱色过程中多糖的收率 ^_^


看到没有，关键是算脱色前后 游离多糖的总量，而脱色前后的水总量保持不变。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2014-06-26 10:02:17
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plhappy2006

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by HarveyWang at 2014-06-26 10:02:17
【我用了2ml的多糖液，加了3ml的水，然后加了0.5%的活性炭，最后上清液稀释了20倍，苯酚硫酸法测定多糖浓度为17ug，】

1. 【加了3ml的水，然后加了0.5%的活性炭】后的上清液，多糖浓度为20 * 17 ug/mL= 340 ug/m ...

谢谢，和我计算出来的一样，我计算了一下，发现多糖的保留率只有40%，脱色效果基本看不出来，所以这种多糖不太适合用活性炭脱色，非常感谢你的耐心回答！多谢多谢！
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3楼2014-06-26 17:33:32
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
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我在给粗酶液脱色的时候发现每种活性炭的结构都不同，你得尝试多几种。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2014-06-26 20:20:14
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环境增值联盟

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
2014化学生物学与一氧化氮（NO）国际会议      大会官网：http://broadway.sjtu.edu.cn，2014年7月4-6日，上海。议题：化学生物学、NO、组学（NO仅为议题中的三分之一）。诺贝尔医学奖获得者Ferid Murad教授担任大会名誉主席，科技部原副部长程津培院士担任大会主席。
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5楼2014-06-27 11:15:53
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plhappy2006

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-06-26 20:20:14
我在给粗酶液脱色的时候发现每种活性炭的结构都不同，你得尝试多几种。

我们实验室只有一种颗粒状的，我试了一下，基本就没有脱色效果，5%都不行，然后多糖损失挺大的，我今天尝试下双氧水脱色，我觉得看起来效果也一般……
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6楼2014-07-01 11:47:25
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