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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 抑菌圈测试 求指点
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柠檬咖啡土豆

新虫 (初入文坛)

[求助] 抑菌圈测试 求指点

小白最近要做抑菌圈测试，查阅文献资料后依旧有几个问题不明白，求指点~

1、菌液是与培养基混合后浇盘（A），还是先浇培养基然后将菌液涂在表面(B)？
2、若用A，培养基应该是防水的吧，那牛津杯或者滤纸上的药液可以渗透进培养基内部杀死内部细菌形成抑菌圈吗，若为B，是涂好菌液就放牛津杯呢，还是等菌液吸收后在放，不会出现涂覆不均匀的情况吗
3、牛津杯中药液用量多少合适呀

跪求点拨求指点
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1楼 2013-01-30 22:00:49
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1856029357

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+5, 鼓励新虫应助！ 2013-02-01 15:20:08
柠檬咖啡土豆: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-02-22 16:40:39
用B，先倒板等板倒好后，取200ul菌液涂板，等菌液干了，然后放置牛津杯。至于药液加多少，如果有文献参考文献，没有文献就自己设个梯度。建议先设以100的梯度。然后在进一步细化。
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乱世出英雄，盛世皆狗熊
2楼2013-01-31 09:14:08
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青铜器333

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-02-01 15:27:25
柠檬咖啡土豆: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-02-22 16:41:09
最近也在做抑菌圈测试，先倒15ml基础培养基，待其凝固后，将灭菌的菌种培养基溶化55℃保温，加入适量的菌悬液混匀，移取5ml注入铺有基础培养基的培养皿中，迅速均匀摊开，置水平台面凝固，牛津杯中药液用量为200ul
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Enjoyeverydayofyourlife.
3楼2013-02-01 09:38:17
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1856029357 at 2013-01-31 09:14:08
用B，先倒板等板倒好后，取200ul菌液涂板，等菌液干了，然后放置牛津杯。至于药液加多少，如果有文献参考文献，没有文献就自己设个梯度。建议先设以100的梯度。然后在进一步细化。

牛津杯直接放置会不会发生侧漏？
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
4楼2013-02-01 09:50:43
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 青铜器333 at 2013-02-01 09:38:17
最近也在做抑菌圈测试，先倒15ml基础培养基，待其凝固后，将灭菌的菌种培养基溶化55℃保温，加入适量的菌悬液混匀，移取5ml注入铺有基础培养基的培养皿中，迅速均匀摊开，置水平台面凝固，牛津杯中药液用量为200ul

这种铺菌的方式学习了，谢谢

但加200ul的药液量是不是太多？100ul足已。多了，是不是更容易发现侧漏？求指点.
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
5楼2013-02-01 09:52:29
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wgy2007

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助！ 2013-02-01 15:20:29
简单的做法是将培养基冷却到50度左右，指示菌液直接加到培养基中混匀后倒板，培养基凝固后用无菌6-8mm的打孔器打孔，将孔内的培养基用无菌牙签抠掉，将50-100ul的药液加到孔内，平放到培养箱内培养即可。
注意：培养基内琼脂的量不能多，一般在0.75-1％，多了会影响药液的扩散。拿、放平板时要平，防止药液溅出影响检测结果。
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6楼2013-02-01 10:44:24
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lgs1

木虫 (小有名气)
这个在药典里面有比较详细的步骤
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7楼2013-02-01 17:47:45
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¤沧海一粟¤

银虫 (小有名气)
路过，即将做这个

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2013-03-19 10:21:29
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