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园园补补

铁虫 (小有名气)

[求助] 转录组测序后,与NCBI上提供的参考基因组mapping率极低的问题 已有6人参与

刚刚接触生物信息学就遇到了一个问题,请各位帮忙解答,不胜感激。
在确定用的菌种无误的情况下,将新鲜菌体液氮处理后干冰送样至公司,之后所有的工作都是公司专业人员操作,但是最近几天却被告知测出来的基因组与NCBI上提供的参考基因组mapping率极低,根本无法理解,找不到原因也没办法让公司重测,就这样一直耗着,请高手帮忙解答一下
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liyf_1987

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
园园补补(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-08-10 10:50:55
需要查看原始数据后才能做出判断。可能原因:
1、测序质量过低。高通量测序大约会有一定比例测序的lane整个失败,但比例很低。如果遇到不懂的人当然就直接把低质量的一起比对再说啦。
2、样本污染。这个就像楼上说的,blast一下。如果楼主不会生物信息,就挑选个20多条看看,注意随机挑选,不要光看前面的,前面的read一般质量都稍差一点哦。但是发现是样本污染,责任就不好界定啦。以我们实验室的经验,很多可能还真是自己不小心。因为有时候污染的样本我通过信息分析后确定了是其它样本污染,所谓的其它样本都没送给公司。
3、大规模变异?不知道你的菌种,NCBI上的reference一般不会和你的一模一样,万一100个bp中有5个变异,你就比对不上啦。测序质量稍微低点,100个bp中有2-3个变异也比不上啊。
综上觉得,一个实验室还是需要真正懂信息分析的人。见过很多实验室生物信息的人,发现完全令人觉得生物信息人员原来可以这么水。
7楼2014-08-08 13:37:35
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cai3110274

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
祝福楼主 按照合同条款  确定问题在公司 可以使用法律武器 保护自己合法权益  不能放任无良公司 忽悠科研工作者
夫天地者万物之逆旅
2楼2014-08-05 19:03:42
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growlywolf

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
园园补补(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-08 09:34:03
如果你这边菌种没有问题,那估计就是菌种在公司被污染了。测序公司出这种事情也不是第一次。
3楼2014-08-07 19:52:01
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园园补补

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by growlywolf at 2014-08-07 19:52:01
如果你这边菌种没有问题,那估计就是菌种在公司被污染了。测序公司出这种事情也不是第一次。

公司怎么都不会承认的。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-08-08 07:03:03
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