9楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-07-30 20:11:04
请问你有相关的文献证明pET28a表达效率低吗？...

11楼: Originally posted by dy_414 at 2014-07-31 22:57:54
个人经验，很难找到有文献专门比较载体表达效率的，因为不同载体适用于不同片段...

12楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-07-31 20:03:13
那为什么同一个基因，全长连这个载体不表达，截掉一段后连这个载体就表达了？求相关与稀有密码子无关的文献...

13楼: Originally posted by dy_414 at 2014-08-01 22:51:01
我个人推断，首先是你truncate掉的序列疏水氨基酸比较多，所以原核表达不易；第二可能是跨膜区，（这个也算第一条）；第三可能有Cys导致半胱氨酸易错配；第四就是这段序列的domain有baterial toxicity。...

5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2014-07-30 15:49:37
你好，冒昧的问一下，你昨晚转化之后有没有进行鉴定来确定是否转化成功？

13楼: Originally posted by dy_414 at 2014-08-01 22:51:01
我个人推断，首先是你truncate掉的序列疏水氨基酸比较多，所以原核表达不易；第二可能是跨膜区，（这个也算第一条）；第三可能有Cys导致半胱氨酸易错配；第四就是这段序列的domain有baterial toxicity。...

8楼: Originally posted by 小苹果168 at 2014-07-31 08:28:24
很多时候原核系统表达不了的蛋白，可以用真核系统表达

17楼: Originally posted by mmojf at 2014-08-04 15:10:10
该段基因是来自于真核生物，是否这种情况说明这个蛋白无法进行原核表达？...

17楼: Originally posted by mmojf at 2014-08-04 15:10:10
该段基因是来自于真核生物，是否这种情况说明这个蛋白无法进行原核表达？...

15楼: Originally posted by mmojf at 2014-08-04 15:01:53
鉴定过，酶切没问题，PCR没问题，测序都是百分百全对。...