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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)

[交流] M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养

小女子最近准备做共培养的实验
是从小鼠腹腔取出巨噬细胞，然后用IL4刺激使其转化成M2型巨噬细胞
再用M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养（用悬挂式培养小室的那种）
想看M2对肿瘤细胞的信号通路的影响

但是有一个问题，巨噬细胞要经过3-4天的IL4刺激才会变为M2型，但是如果共培养的时候再加IL4，IL4不就会从小室里渗到下面的肿瘤细胞里吗？
但是这样就不能排除IL4对肿瘤细胞的影响了。

有没有做过相关实验的前辈，如何避免IL4渗到下面？同时又保证巨噬细胞一直可以受IL4的刺激？
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1楼 2014-07-29 09:16:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小苹果168

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
买一款共培养的培养板，不就OK了吗
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2楼2014-07-29 10:04:09
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laikete

银虫 (小有名气)
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雪松下的记忆: 金币+5 2014-08-19 10:09:08
引用回帖:
10楼: Originally posted by 雪松下的记忆 at 2014-08-19 09:41:01
你做的是直接接触式的共培养吧，我要做的是非接触式的共培养。
我想问你是用IL-4诱导分化吗？我之前做的用IL-4（浓度20ng/ml）诱导macrophage3天，但是流式检测后CD206比例很少...

我们用的IL-4  50ng/ml，诱导48hrs，流式我们206染的不太好，一般我们都是mrna检测Fizz，Arg，Ym1
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如果梦的尽头有美丽的期待
11楼2014-08-19 10:05:47
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普通回帖

nlbtr

铜虫 (小有名气)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个链接可以看一下（http://www.genloci.com/goods.php?id=1280），有需要可联系我：18321267217
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3楼2014-07-29 10:27:30
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mzhyan

至尊木虫 (文坛精英)
blessing
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4楼2014-07-29 10:29:41
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nlbtr

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
HL-60 和 NIH-3T3 共培养。将 NIH-3T3 接种于 10cm 培养皿，Cell Plaza™的每个孔中接种
单个 HL-60 细胞（图 5），培养 2 周后，吖啶橙染色，荧光显微镜观察细胞生长状态（图 6）。这是我们实验室做的结果，你可以参考一下
M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养
15.jpg
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5楼2014-07-29 10:41:58
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小苹果168 at 2014-07-29 10:04:09
买一款共培养的培养板，不就OK了吗

我要用的是悬挂式共培养的小室
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6楼2014-07-29 10:47:35
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by nlbtr at 2014-07-29 10:41:58
HL-60 和 NIH-3T3 共培养。将 NIH-3T3 接种于 10cm 培养皿，Cell Plaza™的每个孔中接种
单个 HL-60 细胞（图 5），培养 2 周后，吖啶橙染色，荧光显微镜观察细胞生长状态（图 6）。这是我们实验室做的结果， ...

我要做的是在6孔板里，放入悬挂式的小室
在小室里放入M2巨噬细胞，下面孔里是肿瘤细胞。
只有一个接触面
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7楼2014-07-29 10:49:37
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nlbtr

铜虫 (小有名气)
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引用回帖:
7楼: Originally posted by 雪松下的记忆 at 2014-07-29 10:49:37
我要做的是在6孔板里，放入悬挂式的小室
在小室里放入M2巨噬细胞，下面孔里是肿瘤细胞。
只有一个接触面...

留个联系方式呗，或者直接打我电话，我给你讲一下Cell Plaza™怎么用
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8楼2014-07-29 11:18:56
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laikete

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你既然做的是M2型mac和tumor cell共培养，那应该诱导M2分化后3天（我们是48hrs），然后把上清洗掉，再加入tumor cell共培养，你觉得呢？
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如果梦的尽头有美丽的期待
9楼2014-08-11 11:34:47
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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by laikete at 2014-08-11 11:34:47
你既然做的是M2型mac和tumor cell共培养，那应该诱导M2分化后3天（我们是48hrs），然后把上清洗掉，再加入tumor cell共培养，你觉得呢？

你做的是直接接触式的共培养吧，我要做的是非接触式的共培养。
我想问你是用IL-4诱导分化吗？我之前做的用IL-4（浓度20ng/ml）诱导macrophage3天，但是流式检测后CD206比例很少
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10楼2014-08-19 09:41:01
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