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雪松下的记忆

金虫 (著名写手)

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专业: 肿瘤干细胞

[交流] M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养

小女子最近准备做共培养的实验
是从小鼠腹腔取出巨噬细胞，然后用IL4刺激使其转化成M2型巨噬细胞
再用M2型巨噬细胞与肿瘤细胞共培养（用悬挂式培养小室的那种）
想看M2对肿瘤细胞的信号通路的影响

但是有一个问题，巨噬细胞要经过3-4天的IL4刺激才会变为M2型，但是如果共培养的时候再加IL4，IL4不就会从小室里渗到下面的肿瘤细胞里吗？
但是这样就不能排除IL4对肿瘤细胞的影响了。

有没有做过相关实验的前辈，如何避免IL4渗到下面？同时又保证巨噬细胞一直可以受IL4的刺激？

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1楼 2014-07-29 09:16:09

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

laikete

银虫 (小有名气)

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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
雪松下的记忆: 金币+5 2014-08-19 10:09:08

引用回帖:

10楼: Originally posted by 雪松下的记忆 at 2014-08-19 09:41:01
你做的是直接接触式的共培养吧，我要做的是非接触式的共培养。
我想问你是用IL-4诱导分化吗？我之前做的用IL-4（浓度20ng/ml）诱导macrophage3天，但是流式检测后CD206比例很少...

我们用的IL-4 50ng/ml，诱导48hrs，流式我们206染的不太好，一般我们都是mrna检测Fizz，Arg，Ym1