应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 基因点突变高TM值，高GC比，怎么做
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 2759  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

vivianvj

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！

[求助] 基因点突变高TM值，高GC比，怎么做 已有1人参与

做了两次点突变，转化之后都没长，引物TM值在71左右，GC比也在70多，请问该怎么解决？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢
1楼 2014-07-24 09:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivianvj

主管区长

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-07-24 10:00:30
使用QuikChange Site-directed mutagenesis kit吗？
你的plamsid多大？72C延长时间足够否？多少扩增循环数？
最重要的，向扩增系统中加点DMSO试试看？

用fastpfu PCR  6000kd多 72度延伸6min   40个循环
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-24 10:07:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

ssssllllnnnn

版主

Translator and Proofreader

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-24 11:20:34
使用QuikChange Site-directed mutagenesis kit吗？
你的plamsid多大？72C延长时间足够否？多少扩增循环数？
最重要的，向扩增系统中加点DMSO试试看？
赞一下 回复此楼
2楼2014-07-24 10:00:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

新虫
引用回帖:
3楼: Originally posted by vivianvj at 2014-07-24 10:07:13
用fastpfu PCR  6000kd多 72度延伸6min   40个循环...

希望你能好好读下这个manual
赞一下 回复此楼

» 本帖附件资源列表

  • 欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
    本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
  • 附件 1 : QuikChangeSite-DirectedMutagenesiskit.pdf
    • 2014-07-24 16:27:14, 324.69 K
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-07-24 16:27:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小苹果168

实习版主

优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！优秀！！有木有！！！
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-08-21 16:11:24
可以用 GC buffer，针对GC含量高的基因进行PCR,我们实验室遇到这种情况就用这个的
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-29 08:56:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +12 zchqwer 2026-04-01 13/650 2026-04-01 22:17 by jp9609
[考研] 339求调剂，想调回江苏 +7 烤麦芽 2026-03-27 10/500 2026-04-01 21:35 by 495374996
[考研] 理学07化学 303求调剂 +11 睿08 2026-03-27 11/550 2026-04-01 21:04 by lijunpoly
[考研] 材料科学与工程339求调剂 +11 hyz0119 2026-03-31 12/600 2026-04-01 18:40 by 伟大河北
[考研] 生物与医药考研调剂 +5 铁憨憨123425 2026-03-31 5/250 2026-04-01 18:01 by syh9288
[考研] 349求调剂 +6 吃的不少 2026-04-01 6/300 2026-04-01 17:55 by JYD2011
[考研] 085600，材料与化工321分，求调剂 +11 大馋小子 2026-03-27 11/550 2026-04-01 16:10 by cymywx
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +4 元元青青 2026-03-31 6/300 2026-04-01 11:13 by syh9288
[考研] 0855机械初试280求调剂 +3 kazenotori 2026-03-31 3/150 2026-04-01 10:08 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +5 Ripcord上岸 2026-03-27 5/250 2026-03-31 19:52 by mg1014
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:07 by Wang200018
[考研] 343求调剂 +8 爱羁绊 2026-03-28 8/400 2026-03-31 16:12 by 不吃魚的貓
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考研] 323分 食品与营养调剂 +3 嘿ooo 2026-03-31 3/150 2026-03-31 09:38 by longlotian
[考研] 11408总分309，一志愿东南大学求调剂，不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 105500药学求调剂，一志愿山东大学药学，348分 +3 gr哈哈哈 2026-03-28 3/150 2026-03-30 18:56 by 源_2020
[考研] 317分 一志愿南理工材料工程 本科湖工大 求调剂 +12 芋泥小铃铛 2026-03-28 12/600 2026-03-30 17:06 by wangjy2002
[考研] 332求调剂 +6 @MZB382400 2026-03-28 6/300 2026-03-30 16:57 by 无际的草原
[考研] 279求调剂 +4 蝶舞轻绕 2026-03-29 4/200 2026-03-29 09:45 by laoshidan
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭