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sfeqhl

铁虫 (正式写手)

[求助] ELISA竞争法标准曲线是负值,怎么弄成正的? 已有1人参与

最近第一次接触竞争法elisa,是这样的,包被的是驴抗羊IgG,然后加一个羊抗GRP(IgG),样品和标准品里面有GRP。再用GRP-HRP与样品和标准品中的GRP竞争,这样就是样品中GRP越低OD值就越高。然后说明书上设置了一个blank孔和B0孔,blank孔就只加过TMB显色液,B0孔是样品稀释液,其他什么都加。最后作图时说明书上出来一个NSB孔的OD值,并且没有任何解释。我想NSB孔是不是就是blank孔。我用常用在线软件 Four Parameter Logistic Fit 作图 ,作出来的图是标准曲线,但是在负值区(x轴右下方)。我们平常用做夹心法用的都是是这个软件和作图系统,是不是竞争法要用别的软件呢?
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-07-17 10:58:47
NSB是阴性对照的OD值,你的标准曲线OD值取值有问题,不然怎么会跑到第四象限去呢?

因为是竞争法,然后OD值越大,浓度就越小。比如说我阴性对照OD值是1.02,标准品设置的最高浓度的OD值只有0.05左右,这样作出来就是负的
3楼2014-07-21 15:29:48
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-07-30 17:58:18
NSB是阴性对照的OD值,你的标准曲线OD值取值有问题,不然怎么会跑到第四象限去呢?
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
2楼2014-07-17 10:58:47
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

引用回帖:
3楼: Originally posted by sfeqhl at 2014-07-21 15:29:48
因为是竞争法,然后OD值越大,浓度就越小。比如说我阴性对照OD值是1.02,标准品设置的最高浓度的OD值只有0.05左右,这样作出来就是负的...

你对OD取了对数作图?
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
4楼2014-07-21 17:32:58
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-07-21 17:32:58
你对OD取了对数作图?...

没有,就是普通的在线作图软件www.myassays.com
5楼2014-07-30 14:11:46
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