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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 抗体/Elisa » ELISA竞争法标准曲线是负值，怎么弄成正的？
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)

[求助] ELISA竞争法标准曲线是负值，怎么弄成正的？ 已有1人参与

最近第一次接触竞争法elisa，是这样的，包被的是驴抗羊IgG，然后加一个羊抗GRP（IgG）,样品和标准品里面有GRP。再用GRP-HRP与样品和标准品中的GRP竞争，这样就是样品中GRP越低OD值就越高。然后说明书上设置了一个blank孔和B0孔，blank孔就只加过TMB显色液，B0孔是样品稀释液，其他什么都加。最后作图时说明书上出来一个NSB孔的OD值，并且没有任何解释。我想NSB孔是不是就是blank孔。我用常用在线软件 Four Parameter Logistic Fit 作图 ，作出来的图是标准曲线，但是在负值区（x轴右下方）。我们平常用做夹心法用的都是是这个软件和作图系统，是不是竞争法要用别的软件呢？
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1楼 2014-07-16 15:34:44
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-07-17 10:58:47
NSB是阴性对照的OD值，你的标准曲线OD值取值有问题，不然怎么会跑到第四象限去呢？

因为是竞争法，然后OD值越大，浓度就越小。比如说我阴性对照OD值是1.02，标准品设置的最高浓度的OD值只有0.05左右，这样作出来就是负的
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3楼2014-07-21 15:29:48
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-30 17:58:18
NSB是阴性对照的OD值，你的标准曲线OD值取值有问题，不然怎么会跑到第四象限去呢？
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2楼2014-07-17 10:58:47
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心
引用回帖:
3楼: Originally posted by sfeqhl at 2014-07-21 15:29:48
因为是竞争法，然后OD值越大，浓度就越小。比如说我阴性对照OD值是1.02，标准品设置的最高浓度的OD值只有0.05左右，这样作出来就是负的...

你对OD取了对数作图？
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年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
4楼2014-07-21 17:32:58
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sfeqhl

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by biotech_zhou at 2014-07-21 17:32:58
你对OD取了对数作图？...

没有，就是普通的在线作图软件www.myassays.com
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5楼2014-07-30 14:11:46
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