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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 如何利用OD值测细菌浓度~~ 已有3人参与

如何利用OD值测细菌浓度~~
求大肠杆菌、肺炎链球菌的菌浓度与OD值的标准曲线~~~~大肠杆菌一般都是在600nm测吗?这种测的一般不是活菌吗?死的可以吗?还有是不是细菌的全波段扫描最大吸收峰基本都是在一个范围内??
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liu0917

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
永远一片天: 金币+1 2014-07-24 15:53:41
离心后测一下看看就好了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-14 12:31:18
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匿名

用户注销 (小有名气)

小辉辉


感谢参与,应助指数 +1
永远一片天: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-07-24 15:53:31
本帖仅楼主可见
3楼2014-07-14 13:10:10
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
永远一片天: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-24 15:53:59
这个我做个,首先您得做个菌悬液,紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中,经3000r/min,离心20min。弃去上清液,用生理盐水洗涤,离心,弃去上清液。洗涤两次后,菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中,定容至刻度(10ml)。另外,以60%的蔗糖溶液作为空白对照,用紫外分光光度计在波长400nm~800nm 范围,测定该菌的吸光值,绘制该菌的吸收光谱谱图。
置于利用od值测细菌浓度一说有误吧,曾经也有学生问过我类似问题,后经询问,得知其为了测生长曲线。我不知您是为了做什么,其实后期,测菌的OD值,主要是对比说明问题。
相信自己,永不言弃
4楼2014-07-15 00:48:52
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liu0917 at 2014-07-14 12:31:18
离心后测一下看看就好了

不大懂~
5楼2014-07-24 15:47:26
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永远一片天

新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-15 00:48:52
这个我做个,首先您得做个菌悬液,紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中,经3000r/min,离心20min。弃去上清液,用生理盐水洗涤,离心,弃去上清液。洗涤两次后,菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中, ...

您好,我是想测出细菌的浓度,即1ml有多少个细菌,您说的60%蔗糖溶液时为了防止测的时候,细菌颗粒下沉吗?用蒸馏水或者直接LB液体培养基可不可以?我不知道母液浓度,想直接在网上找下细菌浓度与OD值的标准曲线。
6楼2014-07-24 15:52:08
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人痴我狂

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-15 00:48:52
这个我做个,首先您得做个菌悬液,紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中,经3000r/min,离心20min。弃去上清液,用生理盐水洗涤,离心,弃去上清液。洗涤两次后,菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中, ...

你好!请问测量细菌OD值,是否可以用不离心,直接吹打混匀然后测量OD值的方法?另外,空白对照只需要一个,还是每一个都离心后用上清对空白对照?
难得癫狂~~~
7楼2014-08-04 09:15:57
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幸福转角515

新虫 (初入文坛)

您好,请问您的这个问题解决了吗? 我也碰到您一样的问题,想测出细菌的浓度,即1ml有多少个细菌。该怎么做呢?希望帮帮忙。
8楼2015-03-12 14:07:26
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Choden

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-15 00:48:52
这个我做个,首先您得做个菌悬液,紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中,经3000r/min,离心20min。弃去上清液,用生理盐水洗涤,离心,弃去上清液。洗涤两次后,菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中, ...

感谢!这样就可以去除培养液中溶质颜色对测试结果的影响啦,受教了
9楼2016-06-21 10:57:40
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