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永远一片天

新虫 (正式写手)

[求助] 如何利用OD值测细菌浓度~~ 已有3人参与

如何利用OD值测细菌浓度~~
求大肠杆菌、肺炎链球菌的菌浓度与OD值的标准曲线~~~~大肠杆菌一般都是在600nm测吗？这种测的一般不是活菌吗？死的可以吗？还有是不是细菌的全波段扫描最大吸收峰基本都是在一个范围内？？
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1楼 2014-07-14 10:15:28
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liu0917

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
永远一片天: 金币+1 2014-07-24 15:53:41
离心后测一下看看就好了

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2楼2014-07-14 12:31:18
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匿名

用户注销 (小有名气)

小辉辉
★
感谢参与，应助指数 +1
永远一片天: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-07-24 15:53:31
本帖仅楼主可见
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3楼2014-07-14 13:10:10
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xuyunjian

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永远一片天: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-24 15:53:59
这个我做个，首先您得做个菌悬液，紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中，经3000r/min，离心20min。弃去上清液，用生理盐水洗涤，离心，弃去上清液。洗涤两次后，菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中，定容至刻度（10ml）。另外，以60%的蔗糖溶液作为空白对照，用紫外分光光度计在波长400nm～800nm 范围，测定该菌的吸光值，绘制该菌的吸收光谱谱图。
置于利用od值测细菌浓度一说有误吧，曾经也有学生问过我类似问题，后经询问，得知其为了测生长曲线。我不知您是为了做什么，其实后期，测菌的OD值，主要是对比说明问题。
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相信自己，永不言弃
4楼2014-07-15 00:48:52
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永远一片天

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liu0917 at 2014-07-14 12:31:18
离心后测一下看看就好了

不大懂~
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5楼2014-07-24 15:47:26
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永远一片天

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-15 00:48:52
这个我做个，首先您得做个菌悬液，紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中，经3000r/min，离心20min。弃去上清液，用生理盐水洗涤，离心，弃去上清液。洗涤两次后，菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中， ...

您好，我是想测出细菌的浓度，即1ml有多少个细菌，您说的60%蔗糖溶液时为了防止测的时候，细菌颗粒下沉吗？用蒸馏水或者直接LB液体培养基可不可以？我不知道母液浓度，想直接在网上找下细菌浓度与OD值的标准曲线。
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6楼2014-07-24 15:52:08
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人痴我狂

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-15 00:48:52
这个我做个，首先您得做个菌悬液，紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中，经3000r/min，离心20min。弃去上清液，用生理盐水洗涤，离心，弃去上清液。洗涤两次后，菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中， ...

你好！请问测量细菌OD值，是否可以用不离心，直接吹打混匀然后测量OD值的方法？另外，空白对照只需要一个，还是每一个都离心后用上清对空白对照？
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难得癫狂~~~
7楼2014-08-04 09:15:57
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幸福转角515

新虫 (初入文坛)
您好，请问您的这个问题解决了吗？ 我也碰到您一样的问题，想测出细菌的浓度，即1ml有多少个细菌。该怎么做呢？希望帮帮忙。
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8楼2015-03-12 14:07:26
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Choden

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xuyunjian at 2014-07-15 00:48:52
这个我做个，首先您得做个菌悬液，紫外全波长扫描。
取5ml培养一周的菌液置于10ml离心管中，经3000r/min，离心20min。弃去上清液，用生理盐水洗涤，离心，弃去上清液。洗涤两次后，菌体重新悬浮于60%的蔗糖溶液中， ...

感谢！这样就可以去除培养液中溶质颜色对测试结果的影响啦，受教了
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9楼2016-06-21 10:57:40
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