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不依赖链接反应的克隆为什么不需要连接酶?
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如果苏西堕落
铁虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 48
帖子: 28
在线: 7.4小时
虫号: 3278535
注册: 2014-06-17
专业: 微生物生理与生物化学
[
求助
]
不依赖链接反应的克隆为什么不需要连接酶?
已有2人参与
我最近在学习Ligase Independent Cloning ,基本原理:T4 DNA聚合酶的3’—5’外切酶活性形成粘性末端,在退火反应中具有同 源序列的载体和插入基因会连接起来;带缺口和突出端的DNA复合物在细菌中能有效被修复。我的问题是,连接酶的作用是回复3,5-磷酸二酯键,如果LIC不需要连接酶,为什么传统方法中限制性内切酶产生的粘性末端就需要DNA连接酶呢?
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1楼
2014-07-10 17:03:47
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忘记将来
木虫
(正式写手)
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在线: 232.9小时
虫号: 815220
注册: 2009-07-24
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
那个是切刻 可以修复啊
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4楼
2014-07-16 16:47:01
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