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目的片段回收后浓度较低,如何浓缩? 已有6人参与
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| 我回收了我的目的片段,条带很暗且稍偏高,浓度有些低,连接表达载体一直连接不上,希望可以把我的目的片段浓缩一下。不知道该如何浓缩,希望知道的大侠们指点一下 谢谢 |
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1.我的表达载体是5900bp,我是直接就是酶切产物回收的 ,就是怕损失。 2.这次涂了两个平板,自己转化的那个板没长,另一个是商品化的阳性质粒,长了满板。可以排除板子和感受态的问题 3.是因为我的两个酶切位点在载体上非常接近,所以不好辨认是否切开,但是我用我同门切好的也是连不上,(我同门连上了)。所以应该不是表达载体的问题。 4.我现在的连接体系是:5微升体系:(基因3ul。载体1ul。T4buffer 0.5ul。T4酶0.5ul) 10微升体系:(基因6ul,载体1ul,buffer1ul,酶1ul,水1ul) 不加水全加基因我也试过,但是也是每长菌。所以我想可能是我的回收片段有问题 |
55楼2014-07-23 08:54:51
for5
木虫 (正式写手)
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2楼2014-07-07 16:19:56
随风飘摇11
木虫 (著名写手)
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3楼2014-07-07 23:12:13
4楼2014-07-08 00:00:30










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