应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » Transwell做荧光黄等标记物测量Papp值时，能用PBS代替HBSS吗？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
121/2返回列表12下一页
查看: 4710  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)

[求助] Transwell做荧光黄等标记物测量Papp值时，能用PBS代替HBSS吗？ 已有2人参与

各位虫友：我的实验是将Caco-2细胞接种到Transwell上，培养21天，期间测量跨膜电阻抗值（TEER），建立肠上皮紧密连接模型。到达18-23天左右，TEER值约为600-800Ω（而在第13天TEER达到最大值1800Ω，之后，逐渐下降，到21天，TEER下降到600-1000Ω，此时做了荧光黄通透性实验），现欲验证紧密连接的完整性，故利用荧光黄来检测表观通透性（Papp）。Transwell上室加0.5ml的200ug/ml荧光黄（PBS为溶剂），下室加1.5mlPBS，培养箱中孵育1h后，在下室取样1ml，利用荧光分光光度计推算透过Transwell的荧光黄浓度（线性提前已做好，在线性范围内。Papp值刚好在n*10^-6cm/s（n=2,3,4,5,6,7），即papp刚好处在10^-6cm/s数量级上，并未达到文献所述的小于10^-6cm/s的要求。
             请问，问题出在哪里呢？
       是紧密连接模型未达到要求（如前所述，电阻值在13天达最大值后又逐渐下降）还是因为透过性试验不能用PBS，只能用HBSS?(因为我看到文献里面一般用HBSS做荧光黄通透性实验)。
           敬请各位同道不吝赐教啊~~~
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

出去

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
向前出发，永远向前！
1楼 2014-07-02 23:40:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

独来独往000

铁虫 (小有名气)
有些细胞荧光负载液最好用HBSS~
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-07-07 16:31:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

icyyang小狸

铁虫 (初入文坛)
不应该用1640吧，不是应该用DMEM吗？我也在做Caco-2的实验。
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

沙伯略
7楼2014-08-09 17:11:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)
大虫们都在忙什么呢？？？给个意见啊~~~
赞一下 回复此楼
向前出发，永远向前！
2楼2014-07-05 19:21:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 独来独往000 at 2014-07-07 16:31:59
有些细胞荧光负载液最好用HBSS~

为什么呢？都是缓冲液啊~为保险起见，我配制荧光黄就用完全培养基行吗？
赞一下 回复此楼
向前出发，永远向前！
4楼2014-07-07 22:14:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

独来独往000

铁虫 (小有名气)
★ ★
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-07-08 10:42:22
引用回帖:
4楼: Originally posted by 沙伯略 at 2014-07-07 22:14:13
为什么呢？都是缓冲液啊~为保险起见，我配制荧光黄就用完全培养基行吗？...

可以的~~因为HBSS有钙和镁 还有葡萄糖  这些对于维持在孵育期间细胞活性也是必要的   1640你试试~
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-08 10:19:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 独来独往000 at 2014-07-08 10:19:35
可以的~~因为HBSS有钙和镁 还有葡萄糖  这些对于维持在孵育期间细胞活性也是必要的   1640你试试~...

好，谢谢，我试试怎么样~
赞一下 回复此楼
向前出发，永远向前！
6楼2014-07-08 12:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by icyyang小狸 at 2014-08-09 17:11:14
不应该用1640吧，不是应该用DMEM吗？我也在做Caco-2的实验。

我用的也是DMEM!
赞一下 回复此楼
向前出发，永远向前！
8楼2014-08-16 18:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

李小慢cat

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

你好！我最近也在做caco-2细胞，也想测荧光黄通透性，请问楼主荧光黄是买的sigma的吗，应该买什么样的呢？买回来之后的梯度浓度就自己配制是吗，能不能请教一下，谢谢~
赞一下 回复此楼
9楼2014-08-18 19:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沙伯略

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 李小慢cat at 2014-08-18 19:55:39
你好！我最近也在做caco-2细胞，也想测荧光黄通透性，请问楼主荧光黄是买的sigma的吗，应该买什么样的呢？买回来之后的梯度浓度就自己配制是吗，能不能请教一下，谢谢~

是sigma的，但是给荧光黄后的孔，电阻值直线下降，最后细胞全死。这只能在最初用于检测膜的致密性与完整性。。。。
赞一下 回复此楼
向前出发，永远向前！
10楼2014-08-18 23:15:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 沙伯略 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0856材料专硕353求调剂 +8 NIFFFfff 2026-03-20 8/400 2026-03-27 09:21 by leocomeon
[考研] 材料与化工考研调剂 +12 孅華 2026-03-22 12/600 2026-03-27 08:58 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +4 李潇可 2026-03-26 4/200 2026-03-27 08:12 by hypershenger
[考研] 348求调剂 +3 小懒虫不懒了 2026-03-27 3/150 2026-03-27 04:30 by wxiongid
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 329求调剂 +5 1() 2026-03-22 5/250 2026-03-26 20:40 by fmesaito
[考研] 材料考研求调剂 +3 Dendel 2026-03-23 6/300 2026-03-26 17:51 by fmesaito
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +4 JKSOIID 2026-03-26 4/200 2026-03-26 15:58 by 不吃魚的貓
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 291 求调剂 +7 化工2026届毕业� 2026-03-21 8/400 2026-03-26 11:25 by AlenQIN.
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 296求调剂 +4 汪！？！ 2026-03-25 7/350 2026-03-25 16:41 by 汪！？！
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[基金申请] 请教下大家 2026年国家基金申请是双盲审吗？ +3 lishucheng1 2026-03-22 5/250 2026-03-24 08:22 by gltch
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭