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尚小静

木虫 (著名写手)

[交流] 做transwell实验细胞迁不过去 郁闷 已有4人参与

白忙活  这是为什么呢  下室和底部均没有
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郝俊杰

至尊木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
出去旅行下,都好了
2楼2013-04-03 09:18:41
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龙之吻851102

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1.确保你的细胞状态完好;2.迁移是细胞在趋化作用下才向某一方向运动的。你查查你的实验设计
你若盛开 清风自来
3楼2013-04-03 12:24:15
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尚小静

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 龙之吻851102 at 2013-04-03 12:24:15
1.确保你的细胞状态完好;2.迁移是细胞在趋化作用下才向某一方向运动的。你查查你的实验设计

下室加了HGF 是不是因为太少了 3ml培养基里面加了3ul  然后平均分4个孔   3ul很难操作
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4楼2013-04-03 14:09:51
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龙之吻851102

新虫 (小有名气)


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引用回帖:
4楼: Originally posted by 尚小静 at 2013-04-03 14:09:51
下室加了HGF 是不是因为太少了 3ml培养基里面加了3ul  然后平均分4个孔   3ul很难操作...

嗯,是的,3ul是很难操作的,有可能挂壁没有打出来,不过还好,我当年加0.1ul也成的,也将枪头在培养液里反复吹打几次。另外HGF是肝细胞生长因子,对你的细胞调控如何?你主要研究你的细胞什么基因,你的细胞是否有此基因,有无相关报道的相互作用,都可以先查查文章,另外,虽然血清是个不可知的复杂环境,但有的细胞维持低环境如2%能够维持细胞生存,也可用FBS牛血清白蛋白低浓度维持。我猜想有可能你的细胞要不都HGF无反应,要不就是细胞出现了凋亡不迁移,你再仔细想下设计和导师或师兄师姐讨论下。祝成功。
你若盛开 清风自来
5楼2013-04-05 07:33:45
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JJ-Emily

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by 龙之吻851102 at 2013-04-05 07:33:45
嗯,是的,3ul是很难操作的,有可能挂壁没有打出来,不过还好,我当年加0.1ul也成的,也将枪头在培养液里反复吹打几次。另外HGF是肝细胞生长因子,对你的细胞调控如何?你主要研究你的细胞什么基因,你的细胞是否有 ...

你好,我现在也遇到这个问题,细胞能将Martrigel降解成有孔,但是细胞和Martrigel是混在一起的,就算有孔,还是没有细胞侵袭下来,最后我把martrigel取下来看,结果细胞全部在martrigel里面,根本侵袭不下去,还望请教。还有就是不加martrigel,细胞室可以下去的。
天道酬勤
6楼2015-04-20 15:30:15
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JJ-Emily

新虫 (初入文坛)


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不知现在问题解决没有,我也遇到一样的问题
天道酬勤
7楼2015-04-20 15:32:38
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icypandora

新虫 (初入文坛)


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铺一万个细胞,上室无血清,下室10%血清,24H
是这个做法吗我们成功率100% 啊
8楼2015-08-10 09:52:35
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