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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 分光光度计对照问题
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liuyi8203

金虫 (小有名气)

[求助] 分光光度计对照问题 已有7人参与

检测微生物酶活，实验组为培养过后的微生物菌液取上清，方法中“以标准空白样为空白对照”这个“标准空白样”是什么？是水还是用于没有接菌的液体培养基？如果是培养基，为何我的实验组会出现负值，难道接过菌的培养基比没有接菌的培养基酶活低？不理解了,求指教
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1楼 2014-07-02 16:29:32
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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dllchina: 金币+2, ^_^ 2014-07-06 00:01:48
对照是水和培养基差异不大，准确点应该是培养基，不过为了方便我们一直用的水。
你用水可以试试，要是也是负值那就不是对照的问题。
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2楼2014-07-02 17:04:21
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a908363630

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+2, 鼓励应助 2014-07-06 00:01:57
取上清液的话你的酶应该是胞外酶喽。。那么对照可以用空白液体培养基的。。至于你的结果为负值，你看看是不是比色皿放反了呀，我曾经就是把比色皿放反过，。按理说不会出现负值的呀，出现负值的话你看看是不是空白对照产生干扰了呢。比如你的液体培养基里加入了葡萄糖，你测的是纤维素酶酶活，那么用含有葡萄糖的空白液体培养基做空白对照，测出来的值会很小或为负值，葡萄糖会产生干扰。不知道你测的什么酶，只是提供下参考。原因还有很多。
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一个人，你做不了什么
3楼2014-07-02 17:31:12
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menghuixian

新虫 (小有名气)
★
dllchina: 金币+1, 鼓励应助 2014-07-06 00:02:09
理论上应该是培养基，出现负值的话可能是菌培养过程中出现了其他的影响，可以想办法处理一下样品，要么就换别的方法测了
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人生最大一种痛，不是失败，而是没有经历自己想要经历的一切。
4楼2014-07-03 08:52:19
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njxmhl

木虫 (小有名气)

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灭过菌的培养基，冷却后。操作过程与样品一致，比如离心、过滤、比色等操作。
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5楼2014-07-03 09:07:25
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499649610

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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对照应该用培养基 确定好你所用的波长 还有是否需要加底物显色？
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6楼2014-07-03 10:12:01
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loasers

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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dllchina: 金币+1, 鼓励应助 2014-07-06 00:02:22
建议楼主用水试试，培养基成分复杂，再加上灭菌影响，空白培养基的不确定性太多，如果你酶活较低，一个误差就损耗进去了。
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Let life be beautifu llike summer flowers and death like autumn leaves
7楼2014-07-03 11:28:25
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周兵lofter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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楼主 你测的时候用一个比色皿 对照和实验组用一个。这样试一试。
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乐观向上 积极拼搏 热爱生命 用心生活
8楼2014-07-03 12:49:06
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倾听花开

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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用培养基，用培养基比较靠谱。因为他们俩的成分相同，一样的。

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9楼2014-07-05 06:30:00
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