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yueyue0520

金虫 (小有名气)

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注册: 2012-12-13
专业: 食品科学基础

[求助] 简化巯基试剂测巯基含量的方法

本人想测定MT提取液中巯基含量，打算用简化巯基试剂的方法但是查到的文献方法如下：

巯基试剂的配置：称取 DTNB 0.0594 g，盐酸胍 0.0172 g，EDTA 0.0112 g 用 0.1 mol/L PBS 试剂
溶解定容至 100 mL。
将样品配成 100 uL 溶液，加入 20 uL 1.2 mol/L HCl 和 400 uL 0.1 mol/L EDTA 反应 10 min 去除金
属，加入 200 uL 巯基试剂，混匀 3 min 使 MT 变性后与 DTNB 形成黄色络合物，用 0.1 mol/L PBS pH7.3
稀释至 6 mL，在 412 nm 处测紫外吸收值。用 C=DA/ε（ε=1.23×104（mol/L）-1·cm-1）测算巯基浓度。
想请教各位大侠这个方法的可行性，以及公式中的D及A代表的含义。A是吸光度值吗那么D呢？
请做过相关课题的大侠们多多指教谢谢！

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