应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 枯草芽孢杆菌表达人源蛋白的问题
51/1返回列表
查看: 2725  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 枯草芽孢杆菌表达人源蛋白的问题

小妹最近在做枯草芽孢杆菌表达人来源的重组蛋白，发现很多蛋白都不表达，或者表达的非常不好。WESTERN可以检测，SDS-PAGE看不到。而芽孢自身来源的重组蛋白表达却不错。但是我的最终目的就是用来表达人源蛋白的。请问做重组蛋白表达的话，枯草芽孢杆菌适合表达什么蛋白呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-24 15:22:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huangrui1988

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by xissy at 2014-06-26 21:32:48
我是选择的WB800。我现在用的是pHT43自身携带的信号肽，淀粉酶的信号肽。
芽孢属的蛋白做了2个，基本上有1mg/300ml，这个是条件还没有优化的。可以满足我的需要。
我想问的是，需要同一个质粒构建几个不同的信号 ...

有必要，你有希望获得更加好的信号肽。
赞一下 回复此楼
7楼2014-06-26 22:09:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

huangrui1988

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xissy(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-06-25 08:33:43
xissy: 金币+3 2014-06-26 21:29:39
gyesang: 应助指数+1 2014-06-29 17:45:57
是这样的，首先选择菌株很重要，WB800敲除了多个蛋白酶，可能对你更加合适。其次，你要选择合适的信号肽来分泌你的蛋白，wb可以检测，说明已经分泌了，你可以看看有没有活性。SDS page的灵敏度肯定没有WB高啊，这个·很正常，一般都要浓缩的，工业上也要高密度发酵的啊，接着分泌水平基本上有10-50倍的提高，所以不用担心。自身来源的蛋白不错，有多不错？g/l?你自己做的数据是？枯草芽孢杆菌表达大宗酶类，如淀粉酶效果不错，可以有25-30g/l
赞一下 回复此楼
2楼2014-06-24 15:56:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

penfour

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励交流！ 2014-06-29 17:46:08
枯草芽孢杆菌表达外源蛋白的话，其分泌能力很差，不像表达同其内源相近的蛋白那样分泌出来，不知你是如何检测的，也许蛋白表达了，只是在胞内，你没有检测到？
赞一下 回复此楼
3楼2014-06-25 16:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pypsak

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励交流！ 2014-06-29 17:46:18
也可能是本身这个表达系统的限制，毕竟现在做抗体药的都是用CHO系统，
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-25 16:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0857调剂 +4 一ll半 2026-02-28 5/250 2026-03-02 02:33 by 908055542
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考研] 0854复试调剂 276 +3 wmm9 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:13 by 热情沙漠
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 12/600 2026-03-01 22:10 by 海嵙Y
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 一志愿中南大学理学化学 +4 15779376950 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:00 by Fff-1
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 7/350 2026-03-01 17:20 by 2026计算机_诚心
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +4 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 7/350 2026-03-01 16:52 by caszguilin
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧？ +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭