24小时热门版块排行榜    

查看: 958  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zhk10482

新虫 (初入文坛)

[求助] 环介导的恒温扩增 已有1人参与

求高手!!!
为什么环介导的恒温PCR中模板不要高温变性,可以直接扩增,引物和模板是怎么杂交上的~~~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pennchem

专家顾问 (正式写手)

LAMP技术的NAR(Notomi等2000年)文章是95度5分钟后,放在冰上,再加入Bst然后才启动反应。Bst酶的作用是链置换反应(strand displacement amplification),不过可惜的是它不是Taq酶,95度5分钟估计就活性难保了。不能用Taq酶是因为Taq不具有强的链置换酶的活性,而且60度的时候,其活性不是很给力。
行至水穷处,坐看云起时
4楼2014-06-18 21:03:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhk10482: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-06-18 09:59:56
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-18 10:41:49
楼主用心了,在开始反应之前,有一个95度的过程,在这个过程中,引物就配对了,这个过程算是启动吧。后面的恒温过程,产物和引物就可以出于一个配对的动态平衡啊。
行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-06-17 21:37:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhk10482

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-06-17 21:37:37
楼主用心了,在开始反应之前,有一个95度的过程,在这个过程中,引物就配对了,这个过程算是启动吧。后面的恒温过程,产物和引物就可以出于一个配对的动态平衡啊。

那像这样的话,聚合酶不都要在变性以后再加入了是吗?有没有耐高温的恒温扩增酶呢,至少在95℃5min条件下活性保持50%以上的
3楼2014-06-18 10:01:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yetingyu---

铁虫 (初入文坛)

酶不耐热,必须在模板变性之后加
5楼2015-10-12 17:09:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +4 医学老男孩 2026-08-13 10/500 2026-08-13 15:22 by 医学老男孩
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] FileCode能看出啥? +8 要乐观耀哥 2026-08-10 26/1300 2026-08-13 12:01 by Tide man
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见