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真心请教有关尿液的GC-MS分析步骤
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我的实验方法如下：取-80℃下保存的血浆与肝组织匀浆样本在室温下解冻，将100ｕL解冻后样本加入 1.5mL离心管中，加入250uL乙腈以沉淀蛋白，并在冰浴冷却下超声10 min，然后放入离心机以10000r/min离心分离10min，离心完毕后取上清液至1.5mL离心试管，然后放入真空干燥器中40℃下挥发至干。挥发干后取出，加入15mg/mL甲氧胺吡啶溶液50ul并充分混匀，之后再70℃条件下肟化lh，然后加衍生化试剂(BSTFA:TMCS=99:1)50 uL硅烷化处理，混匀后静置。lh后加入含二十二烷(内标，0.10mg/mL)的正庚烷150ul，充分混匀后离心分离，移取上清液到微量进样管，供GC-MS分析。GC-MS分析条件：进样量:1uL，不分流进样；初始温度为85℃(保持 5min)，程序升温以10℃/min的速度匀速上升至280℃（保持 5min）；进样口温度:270℃；接口温度:270℃；离子源(EI)温度:230℃；电离电压:70eV；四极杆温度:150℃；载气:高纯氦气:流速1.0mL/min；扫描方式:全扫描60-600m/z。 请教高手帮我看看 这个方法中的漏洞，好吗？真心感谢大家了。 |
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