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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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linsui1989

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白诱导完后用上样缓冲液处理时样品发黏,是怎么回事? 已有3人参与

我最近做大肠杆菌rosseta蛋白表达,用的是pet32a载体,但是处理时样品很粘稠,加样困难,是怎么回事?

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younghe

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
linsui1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-15 21:13:36
菌体太多,多加一些buffer,或者buffer中的盐浓度不要太高,上样前离心
2楼2014-06-15 15:15:22
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
linsui1989(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-06-15 21:13:43
linsui1989: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-06-16 16:58:48
按分子克隆上的比例取样,多煮一会就行,另外离心速度要大一些,我的一般13000g,5min很彻底,取上清上样
只有不断地失败才会成功
3楼2014-06-15 18:14:49
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sqd767019087

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-16 09:59:15
linsui1989: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢 2014-06-16 16:58:27
buffer不够 再加一倍
loading不够
煮时间不够
盐离子太高
4楼2014-06-15 21:34:41
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