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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 酵母双杂交的滴度和计数问题。
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henghengyouyou

银虫 (正式写手)

[求助] 酵母双杂交的滴度和计数问题。

各位，交流一下。

最近看帖说杂交库的滴度问题。达到要求固然好。但是有时可能略低于manual的要求。

1. 有的说滴度和细胞计数板相差可能100倍，滴度要低很多。这是能说明有些酵母细胞在做库或者保存时候死掉了么？还是别的什么原因？
2.如果是滴度低于manual要求10倍，可能是做库的时候没有condense到要求（或者死掉部分），能否在mating的时候，多加入些库呢？比如原来需要1毫升，这次把20甚至30个库condense一下，在进行mating是否可行？
3.关于阴性和阳性对照的mating问题，有个朋友说共转化可以完成，就不需要在mating了，虽然效率低，但还是可以的。当然，mating可以保证成功率。
4.滴度达不到要求固然影响结果，是否必须要重新做库呢？

谢谢各位交流！
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1楼 2014-06-13 23:18:15
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Neo2000

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最好是达到要求，不然你可能筛不到东西，加多点可能是个办法，但是有风险

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2楼2014-06-14 07:40:21
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