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henghengyouyou银虫 (正式写手)
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酵母双杂交的滴度和计数问题。
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各位，交流一下。 最近看帖说杂交库的滴度问题。达到要求固然好。但是有时可能略低于manual的要求。 1. 有的说滴度和细胞计数板相差可能100倍，滴度要低很多。这是能说明有些酵母细胞在做库或者保存时候死掉了么？还是别的什么原因？ 2.如果是滴度低于manual要求10倍，可能是做库的时候没有condense到要求（或者死掉部分），能否在mating的时候，多加入些库呢？比如原来需要1毫升，这次把20甚至30个库condense一下，在进行mating是否可行？ 3.关于阴性和阳性对照的mating问题，有个朋友说共转化可以完成，就不需要在mating了，虽然效率低，但还是可以的。当然，mating可以保证成功率。 4.滴度达不到要求固然影响结果，是否必须要重新做库呢？ 谢谢各位交流！ |
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