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kku6666金虫 (初入文坛)
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[求助]
共聚焦观察fitc-细菌，及样本处理等相关问题
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我是用fitc-标记药物后，与金葡作用不同时间后（1h、2h、3h、4h、6h、8h、10h），滴到玻片制片后，上共聚焦观察药物在菌内的定位情况。 现在有几个问题，一是用pbs洗药物与菌悬液作用后的溶液，离心时转速和时间大约是多少？（这时已经作用了相应的时间）；第二是，制片时我用多聚甲醛固定细菌，用量是多少？我想洗好的菌悬液10ul滴到玻片上后，再加多聚甲醛固定；第三，如果不用防荧光淬灭剂的话，固定好的片子可以放多长时间，多聚甲醛固定后不清洗对荧光有影响吗？因为固定后没有清洗玻片。而且第二天再上共聚焦，标本要过夜，会不会影响荧光强度。有哪位大神做过相关实验或对这方面懂得比较多的指点一下，万分感谢 |
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