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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 昆虫细胞表达产物纯化
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泽雷随

新虫 (初入文坛)

[求助] 昆虫细胞表达产物纯化 已有2人参与

重组杆状病毒是实验室之前构建好的，带his标签的，现在老师叫我扩大培养提纯产物后做单抗，不知道有没有高手做过这方面的东西，该用什么纯化方法或者哪个公司的纯化试剂盒好些，有这方面的资料也行，刚开始做实验，什么都不懂，求贵人相助，不剩感激。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-06-08 21:10:02
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yym123321

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

将病毒感染到对数期生长的昆虫细胞，然后收蛋白，将蛋白选用纯化柱（带his标签的纯化柱）（大量的蛋白可联接低压层析仪器）进行分离、纯化。
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不要轻言放弃
5楼2017-11-01 14:12:36
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hjd8886

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们目前是使用Ni柱纯化，然后用蔗糖浓缩。但是有些蛋白形成包涵体，不溶，用8M尿素可以溶，但是还要透析复性，很是头大。
问下楼主有没有解决问题，可以讨论下。
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2楼2014-07-16 13:52:16
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泽雷随

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hjd8886 at 2014-07-16 13:52:16
我们目前是使用Ni柱纯化，然后用蔗糖浓缩。但是有些蛋白形成包涵体，不溶，用8M尿素可以溶，但是还要透析复性，很是头大。
问下楼主有没有解决问题，可以讨论下。

额，我做的蛋白是可融的，没有涉及到变复性这个问题，这方面我也不太懂

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-07-17 01:11:22
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2928134954

新虫 (初入文坛)
使用Ni柱可有效纯化带His标签的蛋白，洗脱使用咪唑
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4楼2015-04-10 21:41:54
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