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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 有人在做BiFC吗？
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鸦米

新虫 (小有名气)

[交流] 有人在做BiFC吗？ 已有16人参与

因为我近期要做BiFC,我们实验室之前没有人做过，所以想请教曾经做过的朋友一些问题，哪位做过可以交流一下吗？
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1楼 2014-06-04 11:54:13
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
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19楼: Originally posted by gyesang at 2014-06-07 19:08:22
的确我的蛋白比较大，1700多个aa，荧光强度比较低，我想过可能有两个原因：
1. 荧光蛋白的N和C端，接上目的蛋白，目的蛋白影响了荧光蛋白正确构象的形成，导致互补后荧光强度低

2. 荧光蛋白的N或者C端能够形成 ...

试试用不同的BIFC载体，分别连在N端或C端试试。对蛋白构象的影响，我感觉荧光蛋白没那么大，不用太担心，很可能影响还是你说的第二条。另外，你用的载体上启动子是什么？
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
21楼2014-06-08 06:03:46
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我在做，有什么问题请详细列出来
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鸦米
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2014-06-04 16:43:30
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鸦米

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-04 16:43:30
我在做，有什么问题请详细列出来

可以留下QQ吗？我刚开始做，实验室也没有人做过，可能问题会比较多
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3楼2014-06-05 08:23:55
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鸦米

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2014-06-04 16:43:30
我在做，有什么问题请详细列出来

要是不方便的化我先问几个问题吧，你们是转的拟南芥原生质体吗？操作上有什么需要注意的吗？
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4楼2014-06-05 08:25:54
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